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酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)都有哪些基本模式?
閱讀:1538 發(fā)布時(shí)間:2017-5-25在這十多個(gè)必經(jīng)步驟中,洗板、洗滌就有著兩種不同的模式,說(shuō)它簡(jiǎn)單又覺(jué)得復(fù)雜,說(shuō)它不易做又覺(jué)得基本步驟也就那么些,其實(shí)只要我們?cè)谶^(guò)程中稍加注意,再多了解就能做出漂亮的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)究竟都有哪些基本模式呢?
1、將病原體的抗原在碳酸鹽緩沖液中4~C放置一個(gè)晚上包被,形成固相抗原,洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗原后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì)。
2、加入含待測(cè)抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),待測(cè)抗體就會(huì)與固陽(yáng)上特異抗原反應(yīng)而吸附于固相上。
3、加入酶標(biāo)記的抗人IgG抗體,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),在固相上即形成固相抗原—待測(cè)抗體—酶標(biāo)二抗復(fù)合物。
4、加入酶底物,溫育顯色測(cè)定。間接法測(cè)抗體在目前應(yīng)用zui多的是丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗體(抗HIV)以及梅毒螺旋體抗體等的測(cè)定。從上述的測(cè)定模式可見(jiàn),間接法測(cè)抗體,嚴(yán)格地講,所測(cè)定的僅為抗體的IgG類,不涉及IgM和IgA類,這是由酶標(biāo)二抗體所決定的。
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