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技術(shù)文章

ELISA洗滌方法大揭秘

閱讀:4708          發(fā)布時(shí)間:2019-4-17

    上海恒遠(yuǎn)專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年,涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,滿足您實(shí)驗(yàn)所需,以實(shí)現(xiàn)與客戶的雙贏,完善的庫(kù)存及供應(yīng)體系以及穩(wěn)定的專業(yè)技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)。期待您前來(lái)咨詢選購(gòu)。近日,客戶介紹自己在洗板操作過(guò)程遇到棘手問(wèn)題,麻煩我司技術(shù)給她提供解決處理方法及建議。主要問(wèn)題如下:

    問(wèn)題一:說(shuō)明書(shū)上說(shuō)洗板時(shí)要把孔里的水甩干,可我做的時(shí)候,無(wú)論我怎么拍,孔底還是有殘留液體,請(qǐng)問(wèn)這對(duì)試驗(yàn)有沒(méi)有影響?或著有沒(méi)有別的什么好的辦法可以解決這個(gè)問(wèn)題?

    答:有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好,會(huì)出現(xiàn)非特異.ELISA試驗(yàn)中洗滌是關(guān)鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是后一次洗滌要盡量干。洗滌中另一個(gè)值得注意的是盡量不要出氣泡。如果有條件的話,可用洗板機(jī)。

    問(wèn)題二:什么才叫封閉好了呢?有沒(méi)有什么標(biāo)準(zhǔn)?

    答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果還有非特異反應(yīng)的話,可能有其他原因,比如加樣時(shí)濺到了壁上或有氣泡,洗滌不充分,二抗?jié)舛冗^(guò)高,封閉物不合適以及反應(yīng)條件是否得當(dāng)?shù)取?/span>

    問(wèn)題三:1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過(guò)pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結(jié)果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多。

    答:1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作,背景高不一定是封閉的問(wèn)題。

    ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點(diǎn)

    一、手工洗板方法

    吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

    二、自動(dòng)洗板

    如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等。

    恒遠(yuǎn)是一家生產(chǎn)和銷售科學(xué)研發(fā)用試劑產(chǎn)品公司,領(lǐng)域涵蓋化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)和材料科學(xué)等基礎(chǔ)創(chuàng)新領(lǐng)域,助力客戶的研究計(jì)劃,在廣大科研用戶的幫助和支持下,經(jīng)過(guò)不懈的努力,以過(guò)硬的產(chǎn)品質(zhì)量和好的服務(wù)態(tài)度,為客戶提供一個(gè)穩(wěn)定平臺(tái),成為客戶可信賴的長(zhǎng)期合作伙伴。

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