本試劑盒僅供研究使用。

伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的：

本試劑盒用于飼料、魚(yú)、蝦和肉類(lèi)組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血

清和尿樣中伏馬毒素（FB1）殘留的定量檢測(cè)。

伏馬毒素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA 方法，在微孔板包被有伏馬毒素（FB1）偶聯(lián)抗原，加入伏

馬毒素（FB1）標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，游離伏馬毒素（FB1）與微孔條上預(yù)包被的伏馬毒素（FB1）

偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗伏馬毒素（FB1）抗體酶標(biāo)記物，用TMB 底物顯色，加入終止液后顏

色由藍(lán)色變?yōu)辄S色，用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，吸光值與樣品中伏馬毒素（FB1）

含量成反比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中伏馬毒素（FB1）的含量。

伏馬毒素ELISA試劑盒組成

預(yù)包被的伏馬毒素（FB1）偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板：1 塊（12 孔×8 條）。

伏馬毒素（FB1）標(biāo)準(zhǔn)品：6 瓶（1ml/瓶），含量分別是： 0 ppb，0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7

ppb,8.1 ppb。

抗伏馬毒素（FB1）抗體酶結(jié)合物：1 瓶（6ml）。

顯色液A：1 瓶（6ml）。

顯色液B：1 瓶（6ml）。

終止液：1 瓶（6ml），2M 硫酸。

樣本稀釋液：1 瓶（10×, 6ml），用于樣品稀釋用。

濃縮洗滌液：1 瓶（20×，20ml），用于洗板。

說(shuō)明書(shū)一份。

伏馬毒素ELISA試劑盒貯存：

1.試劑盒貯存于2~8℃，切勿冷凍

2.未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存

伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1.使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。

2.不要使用過(guò)期試劑盒。

3.試劑盒使用前，將試劑恢復(fù)至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時(shí)。

4.標(biāo)準(zhǔn)品中含有伏馬毒素（FB1），使用時(shí)應(yīng)特別注意，操作時(shí)應(yīng)帶手套。

5.終止液中含有硫酸，使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。

6.不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用，否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。

7.不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用；不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用，否則會(huì)影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

8.稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果

9.混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。

伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準(zhǔn)備

伏馬毒素（FB1）標(biāo)準(zhǔn)品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb

濃縮洗滌液：用蒸餾水按1:20（1+19）稀釋備用

樣本稀釋液：備用

顯色劑：已備用，避免光線(xiàn)直照

反應(yīng)終止液：已備用

伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理：

取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液

強(qiáng)力振蕩3分鐘

用Whatman 濾紙過(guò)濾

取25μl處理后的樣品，加入25μl樣本稀釋液于反應(yīng)孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）

伏馬毒素ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算

定量分析：

所獲得的每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值（B）除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）

的吸光度值（B0）再乘以100%，即百分吸光度值。

B— 標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

B0— 0μg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

以伏馬毒素（FB1）濃度的對(duì)數(shù)值為X軸，百分吸光度值為Y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。根

據(jù)樣品百分吸光度值，可從曲線(xiàn)上得到對(duì)應(yīng)點(diǎn)的橫坐標(biāo)，即為伏馬毒素（FB1）濃度的對(duì)數(shù)

值，求得反對(duì)數(shù)即為測(cè)定液中伏馬毒素（FB1）濃度C（ppb）

由于樣品經(jīng)過(guò)了預(yù)先稀釋?zhuān)虼烁鶕?jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋

倍數(shù)。

半定量測(cè)定：

目測(cè)半定量測(cè)定：首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行，根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光

度值的高低比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。

儀器半定量測(cè)定：首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行，根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色

深淺比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。