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分光光度計(jì)的用途和波長(zhǎng)范圍介紹
閱讀：2303 發(fā)布時(shí)間：2017-5-3
(1).核酸的定量核酸的較為高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。利用260nm的波長(zhǎng)可以定量測(cè)量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA的濃度。除了核酸濃度，分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值，用于評(píng)估樣品的純度，因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?/span>280nm。純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。 A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。 A320檢測(cè)溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。
(2).蛋白質(zhì)的直接定量這種方法是在280nm波長(zhǎng)，直接測(cè)試蛋白。選擇Warburg 公式，光度計(jì)可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。
(3).細(xì)菌細(xì)胞密度細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中，需要采用分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)方法。在600nm波長(zhǎng)下，以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液，測(cè)量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。