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分光光度計的用途和波長范圍介紹
閱讀：2300 發(fā)布時間：2017-5-3
(1).核酸的定量核酸的較為高吸收峰的吸收波長260 nm。利用260nm的波長可以定量測量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA的濃度。除了核酸濃度，分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度，因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。 A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。 A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。
(2).蛋白質(zhì)的直接定量這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。選擇Warburg 公式，光度計可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。
(3).細(xì)菌細(xì)胞密度細(xì)菌培養(yǎng)過程中，需要采用分光光度計準(zhǔn)確測定細(xì)菌細(xì)胞密度。OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長的標(biāo)準(zhǔn)方法。在600nm波長下，以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液，測量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。