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電泳實驗的危害與防護注意事項

時間:2018/11/16閱讀:3771
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1.DNA電泳與溴化乙錠

“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑,具有高致癌性,會在60~70 cc蒸發(fā),所以在學生實驗中要特別注意其安全使用,嚴禁隨便丟棄。在實驗中使用及實驗結束后處理應注意以下事項。

1.1 使用中注意事項

 實驗室涉及到EB的操作應統(tǒng)一固定在實驗室的某一角落,稱量固體時要帶面罩和手套,使用含有EB的溶液務必帶上手套。同時不要在膠太熱的時候加EB,以防止因蒸發(fā)被吸入。接觸到EB的玻璃器皿應集中放置并專門使用,污染到EB的槍頭、抹布、手套及EB染色跑完的膠,回收至棕色的玻璃瓶中,定期進行焚燒處理舊。桌面或物體表面污染到EB時,可用活性碳進行處理。

 1.2  廢EB溶液處理
 (1)EB濃溶液(濃度大于0.5 mg/mI)的凈化處理
先將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5 mg/mI,加人1倍體積的5%次高錳酸鉀,小心混勻后再加1倍體積的2.5 moL/L鹽酸。小心混勻,于室溫放置數(shù)小時;加入l倍體積的2.5 mol/L氫氧化鈉,小心混勻后可丟棄該溶液,統(tǒng)一處理。

 (2)EB稀溶液(濃度小于0.5 mg/mI)的凈化處理按1 mg/mL的量加入活性炭,不時輕搖混勻,室溫放置1 h;用濾紙過濾溶液,丟棄濾液并將活性碳與濾紙密封后丟棄,統(tǒng)一處理。

2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳與有毒、有害物質

聚丙烯酰胺凝膠電泳在生物化學實驗中是常用的實驗手段,涉及到蛋白質分離純化及鑒定、蛋白質分子量及等電點測定的實驗都會使用到該電泳方法,如“聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質”、“SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的相對分子量”、“聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦法測定蛋白質等電點”等基礎實驗。在聚丙烯酰胺凝膠制備過程中用到以下有毒、有害物質:

2.1   丙烯酰胺
 丙烯酰胺具有很強的神經毒性,同時還有生殖、發(fā)育毒性。神經毒性作用表現(xiàn)為周圍神經退行性變化和腦中涉及學習、記憶和其他認知功能部位的退行性變化。實驗還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物。丙烯酰胺可通過皮膚吸收及呼吸道進入人體,且累積毒性,不容易排毒。因此,稱量固體丙烯酰胺粉末和處理它們的溶液時必須戴手套口罩。當丙烯酰胺聚合為聚丙烯酰胺凝膠時則為無毒的,但操作時仍要小心,凝膠內可能有少量未聚合的丙烯酰胺。

2.2  甲叉雙丙烯酰胺
 甲叉雙丙烯酰胺是丙烯酰胺形成凝膠的交聯(lián)劑,因有取代基丙烯酰胺,因此具有一定的毒性,能輕微刺激眼睛、皮膚和粘膜。稱量固體粉末和處理它們的溶液時需戴手套口罩,應避免與人體長時間直接接觸,誤碰觸時應用清水洗凈。

2.3  TEMED
 TEMED是形成凝膠反應所用的加速劑,也具有強神經毒性,應防止誤吸,操作時快速,存放時密封。

2.4  過硫酸銨
 過硫酸銨是丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺進行化學聚合的引發(fā)劑,對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸人可致命。操作時需戴合適的手套、安全眼鏡和面罩,始終在通風櫥里操作,操作完后*洗手。

2.5  十二烷基硫酸鈉(SDS)
 SDS是·種陰離子表面活性劑,與蛋白形成復合物,用于測定蛋白質分子量。SDS有毒,是一種刺激物,能對眼睛造成嚴重損傷,可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康。稱量及配溶液時不要吸人其粉末,需戴合適的手套、面罩護目鏡

2.6  巰基乙醇
 它在測定蛋白質分子量時用于處理樣品,吸入、攝人或經皮膚吸收后會中毒。其中毒表現(xiàn)有紫紺、嘔吐、震顫、頭痛、驚厥、昏迷,甚至死亡;對眼、皮膚有強烈刺激性;對環(huán)境有危害;對水體可造成污染。應在通風櫥里操作,佩戴面罩,戴乳膠手套

3.  RNA提取與有毒、有害溶劑

“動物肝臟RNA的制備和純度測定”是生物化學實驗課中必開的基礎實驗,RNA的提取過程需要用到溶劑去除蛋白質,這些溶劑對人體具有一定的毒性。

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