選購熒光酶標儀的七點注意詳解

基于熒光的檢測方法在生命科學研究中應用廣泛。市面上有多種試劑盒和試劑可用于熒光酶標儀所涵蓋的各種檢測類型。

常見熒光檢測應用包括DNA/RNA定量、鈣測定、酶活性、基因表達、GPCR的第二信使信號、細胞凋亡測定、細胞增殖、轉(zhuǎn)染效率、細胞毒性等。

如果您正在選購一臺熒光酶標儀，各種規(guī)格、選項和功能也許會讓您挑花了眼。為此，我們總結了7個最重要的關注點，讓我們?yōu)槟灰坏纴怼?/p>

1/靈敏度

毋庸置疑，靈敏度更高的酶標儀能夠提供更好的數(shù)據(jù)和統(tǒng)計結果，重復樣本之間的差異更小，有反應和無反應樣本之間的距離（assay window）更大。更高的靈敏度還有助于減少試劑和樣品的用量，使檢測更加精簡的同時，生成高質(zhì)量的結果。這將有效降低每個樣品的檢測成本

2/動態(tài)范圍

在熒光強度檢測中，樣品的濃度范圍通常較大。在熒光酶標儀上測量的信號可能會跨越從極弱到強的范圍。還有，基于酶或細胞動力學檢測的樣品通常很難預測其信號強度，因為在動力學檢測過程中，最大信號會隨著時間而累積。

在這些情況下，可能很難在一次測量中用一種設置獲取所有樣品的信號。信號強度高的樣品可能會使酶標儀的熒光檢測器飽和；信號強度低的樣品可能無法與空白樣品區(qū)分開來。

如果熒光酶標儀支持較大的動態(tài)范圍，可在單次運行中讀取差異很大的樣品，避免試出正確的稀釋倍數(shù)和熒光增益比率所造成的試劑和時間浪費。BMG LABTECH的 CLARIOstar® Plus和VANTAstar® 酶標儀配備的動態(tài)范圍擴展技術(EDR)提供具有競爭力的動態(tài)范圍（8個數(shù)量級濃度），可在單次運行中自動測量極弱和強的信號，無需進行調(diào)節(jié)。

3/波長選擇

激發(fā)和發(fā)射波長是任何熒光檢測的必要參數(shù)。選擇合適的波長可降低通常由樣品和微孔板的光散射或自發(fā)熒光引起的非特異性背景或干擾。

4/兼容的微孔板規(guī)格

在生命科學研究中，進行基礎的熒光測定一般使用黑色96孔微孔板。但如果您有多種樣品，并希望節(jié)約寶貴的試劑或時間，也可以使用384孔和1536孔板。只需確保您選擇的熒光酶標儀也能兼容您計劃使用的微孔板規(guī)格。還有一點，吸光、熒光和化學發(fā)光檢測需要不同顏色的微孔板，分別為透明、黑色和白色

5/試劑注入裝置

在選購熒光酶標儀時，還應考慮分析應用的性質(zhì)。對于酶動力學檢測或基于細胞實時反應的檢測，試劑注入器能派上大用場。手動將試劑移入孔中有可能導致反應的重要數(shù)據(jù)丟失。特別是對于一些快速反應，可能還沒來得及檢測，您所尋找的信號就已經(jīng)消失了。我們的熒光酶標儀配備了試劑注入器，注射和信號檢測同時在一個孔中進行，然后在下一個孔繼續(xù)進行（圖 5）。這樣一來，即使是快速反應，您也不會錯過任何數(shù)據(jù)點。

6/環(huán)境控制

如果您需要進行基于活細胞的測定，又想避免在熒光酶標儀和培養(yǎng)箱之間來回移動微孔板，請確保您選擇的酶標儀具有控制其內(nèi)部氣體環(huán)境和溫度的功能。

BMG LABTECH酶標儀可集成大氣控制單元（ACU，圖 6）。ACU可獨立調(diào)節(jié)酶標儀倉內(nèi)的氧氣和二氧化碳含量，為活細胞檢測應用提供理想的環(huán)境。與振蕩和恒溫孵育功能相結合，ACU為基于細胞的檢測（從標準細胞生長到缺氧檢測等）提供了真正不用操心的“甩手"解決方案。

7/數(shù)據(jù)分析軟件

酶標儀的軟件是容易被低估的選購要點。有些酶標儀軟件只能控制測定過程并提供原始檢測數(shù)據(jù)輸出，也有些軟件可以進行復雜的分析。

一款全面、易用、靈活的軟件是您的得力助手，可簡化檢測和數(shù)據(jù)分析過程，使儀器發(fā)揮應有的作用。

熒光檢測中的計算功能包括自動扣除空白，以及根據(jù)標準曲線自動計算濃度、Km和Vmax等酶常數(shù)。

對于常見的測定應用，BMG LABTECH軟件包提供預設的快速測定專用方案和專用分析模板。通過這些專用解決方案，只需單擊鼠標即可采集和分析數(shù)據(jù)，使研究人員能夠快速、輕松地進行實驗（圖 7）。