cambcollabs三螺旋肽簡(jiǎn)介

CambCol實(shí)驗(yàn)室合成膠原樣三螺旋肽用于研究用途。它們有不同的結(jié)構(gòu)形式，用于不同的目的，但它們的關(guān)鍵共同特征是[GXX']n基序，這是

三螺旋組件。我們的大多數(shù)肽含有GPP或GPO重復(fù)序列（Gly-Pro-Pro或Gly-Pro-Hyp）。

這些富含亞氨基酸的序列形成穩(wěn)定的三螺旋結(jié)構(gòu)，在高于37°C（通常為45-50°C）的溫度下熔化（展開(kāi)）[1,2]。我們制造以GPP或GPO重復(fù)序列為主要成分的肽，

它保持三螺旋結(jié)構(gòu)，以及另一個(gè)序列（例如結(jié)合整合素的GFOGER基序）作為客體序列插入GPP或GPO宿主序列框架的肽[3]。在很多情況下，

在N端和C端都包含含有Cys的三聯(lián)體，以允許出于特定目的交聯(lián)Cys殘基巰基[4]。這是我們受體特異性肽的常見(jiàn)形式。

為您的特定應(yīng)用格式化的肽：

•對(duì)于蛋白質(zhì)或細(xì)胞結(jié)合分析的表面涂層，含半胱氨酸的肽可能是好的。自發(fā)形成的二硫化物可能會(huì)導(dǎo)致肽的低聚合物的存在，其中協(xié)同結(jié)合會(huì)促進(jìn)表面吸附[5]。在我們手中，用于蛋白質(zhì)結(jié)合研究的96孔板在這種情況下工作良好。

例如i-II-28，GPC[GPP]5GPP霧劑[GPP]5GPC酰胺

•如果肽僅在溶液中使用，那么不含Cys的三聯(lián)體宿主序列可能是好的，因?yàn)椴粫?huì)發(fā)生自發(fā)氧化聚合[5]。競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合分析中使用的此類肽[4,6]，

例如，它將產(chǎn)生更簡(jiǎn)單的結(jié)合動(dòng)力學(xué)。

例如Si-II-28、[GPP]5G霧劑[GPP]5-酰胺

•使用肽制備蛋白質(zhì)-肽復(fù)合物用于結(jié)構(gòu)研究，最小化肽的長(zhǎng)度可能是有用的。在這種情況下，[GPO]3宿主序列允許相對(duì)較短但同樣穩(wěn)定的肽

待生產(chǎn)（Tm）≥ 20攝氏度[7]。N-末端的乙?；ㄟ^(guò)消除鏈間電荷排斥提高穩(wěn)定性。這種策略可能適用于使用4°C結(jié)晶條件的晶體學(xué)研究，但較長(zhǎng)的肽、[GPO]4宿主將為室溫結(jié)晶提供更高的熱穩(wěn)定性。

例如Ci-II-28、[GPO]2霧劑[GPO]3-酰胺

•衍生肽，例如含有熒光素或其他熒光團(tuán)，或含有生物素，可用于細(xì)胞表面標(biāo)記研究。

例如Fi-II-28，F(xiàn)ITC-[GPP]5G霧劑[GPP]5-酰胺

•膠原工具包，包含膠原II、膠原III或膠原XIII COL結(jié)構(gòu)域全序列的重疊三螺旋肽庫(kù)，可用于將膠原結(jié)合蛋白映射到

這些膠原蛋白的主要序列[2,8,9]。我們可以提供預(yù)先涂在96孔板上的工具包，或者我們可以在實(shí)驗(yàn)室與您合作，繪制目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合位點(diǎn)。

一個(gè)例子是II-28，GPC[GPP]5geagaoglvgprgergfogersogaq[GPP]5GPC酰胺

如果你的配體結(jié)合位點(diǎn)已知，可以提供單獨(dú)的工具包肽，我們將與你合作，在未知的地方更緊密地定義結(jié)合位點(diǎn)。CambCol Laboratories已經(jīng)接管了美國(guó)劍橋法恩代爾實(shí)驗(yàn)室collagentoolkit網(wǎng)站的權(quán)益。

搬運(yùn)和儲(chǔ)存

肽粉

•在-20°C（零下20°C）下儲(chǔ)存，粉末肽將無(wú)限期保存。我們提供了所提供肽的準(zhǔn)確重量（通常為1.1毫克），您應(yīng)在0.01M醋酸中溶解至至少2.5毫克/毫升。

在4°C下儲(chǔ)存一晚，以便在使用前形成完整的三螺旋。你可以等分，比如說(shuō)20µl的批次，快速冷凍，并根據(jù)你的喜好在-20°C（零下20°C）或-80°C（零下80°C）下儲(chǔ)存。

•您的工作庫(kù)存小份可在+4°C（+4°C）下儲(chǔ)存，以便立即使用（最多4周）。避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存稀釋溶液（<1 mg/ml），否則肽可能會(huì)因吸附到管壁或在非常稀釋的溶液中展開(kāi)三螺旋而丟失。

•避免多次重新冷凍和解凍，因?yàn)檫@可能會(huì)導(dǎo)致肽沉淀。如果你能在溶液中看到顆粒物質(zhì)（肽聚集體），*旋渦（2分鐘）以分散它們。

或者，你可以用超聲波檢查，注意不要讓管子過(guò)熱。CRP-XL以溶液形式提供

•我們可以提供CRP-XL作為粉末，按上述方式處理，或作為冷凍溶液≥ 在0.01M醋酸中加入2.5mg/ml。你可以解凍、等分、速凍，并將等分保存幾個(gè)月。解凍時(shí)，檢查

可見(jiàn)聚集體的存在。如果存在，通過(guò)上述大范圍渦流和/或超聲波分散。

•不要加熱CRP-XL懸浮液（一些方案要求對(duì)非交聯(lián)肽進(jìn)行熱變性，以恢復(fù)單鏈狀態(tài)，然后通過(guò)冷卻重新折疊）。我們認(rèn)為這一過(guò)程將是有害的

對(duì)于CRP-XL，由于變性但交聯(lián)的肽不太可能準(zhǔn)確地重新折疊。