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技術(shù)文章

一場(chǎng)微生物快速定量的革新—螺旋平板法

閱讀:898          發(fā)布時(shí)間:2021-12-8

螺旋平板法


螺旋平板法(Spiral plate method)是一種新式微生物快速定量方法,由J.E. Gilchrist、C.B. Donnelly等人最先于1973年提出,主要用于菌落總數(shù)測(cè)定。


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螺旋接種菌落計(jì)數(shù)是依據(jù)阿基米德螺旋原理,使樣品以對(duì)數(shù)規(guī)律螺旋線形式接種在平板上。


樣品接種后,菌落即分布在螺旋軌跡上,隨半徑的增加分布得越來越稀。


采用特殊的計(jì)數(shù)柵格,自平板外周向中央對(duì)平皿上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),即可得到樣品中微生物的數(shù)量。


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實(shí)驗(yàn)步驟



  1. 取制備好的適宜稀釋度的樣品稀釋液;

  2. 選擇模式進(jìn)行接種;

  3. 將平板按標(biāo)準(zhǔn)方法中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度進(jìn)行培養(yǎng);

  4. 計(jì)數(shù)每個(gè)平板菌落數(shù),并記錄下來。

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螺旋平板法使我們能在培養(yǎng)皿表面接種呈對(duì)數(shù)遞減的曲線。體積是被校準(zhǔn)過的,培養(yǎng)皿上每個(gè)點(diǎn)的容量都是可知的。計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿范圍區(qū)域內(nèi)的菌落數(shù),除以該區(qū)域的接種體積,以此可計(jì)算出細(xì)菌濃度。


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經(jīng)過多年的應(yīng)用,螺旋平板法已被國外微生物學(xué)界普遍認(rèn)可,被列為美國分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)的*方法,也被美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)列為檢測(cè)致病菌的標(biāo)準(zhǔn)方法。


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我國也在《GB 4789.28-2013食品微生物學(xué)檢驗(yàn)—培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》《SN/T 2098-2008食品和化妝品中的菌落計(jì)數(shù)檢測(cè)方法—螺旋平板法》中對(duì)螺旋平板法的實(shí)驗(yàn)要求和具體步驟都作了明確規(guī)定。

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左右滑動(dòng)查看標(biāo)準(zhǔn)


為什么選擇螺旋平板法?


◆ 無需梯度稀釋和逐個(gè)接種平板,在一塊平板上即可產(chǎn)生最大1000倍的濃度梯度

◆ 簡化實(shí)驗(yàn)步驟,節(jié)省操作時(shí)間

 節(jié)省大量實(shí)驗(yàn)材料,節(jié)約費(fèi)用

◆ 樣品接種量精確,提高微生物定量實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度

◆ 不會(huì)在平板邊緣長菌,更易計(jì)數(shù)


微生物學(xué)研究結(jié)果的可重復(fù)性很大程度上依賴于優(yōu)良的樣品制備。螺旋平板法作為一種新式微生物快速定量方法可降低試驗(yàn)成本、提高實(shí)驗(yàn)效率,優(yōu)勢(shì)突出,應(yīng)用前景廣闊。


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杭州大微研發(fā)的DW-L2000型全自動(dòng)微生物平皿螺旋接種儀依據(jù)阿基米德螺旋,以遞減比率自動(dòng)接種樣本,可實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化大量單顆菌落,方便后續(xù)菌落計(jì)數(shù)、菌落分析純化等實(shí)驗(yàn)需求,廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室等任何微生物實(shí)驗(yàn)室。


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產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

 接種模式:整合市面所有的接種模式,如指數(shù)模式、對(duì)數(shù)模式、比例模式、微分模式等等,每種模式均以加樣半徑為橫坐標(biāo)、加樣體積為縱坐標(biāo),以阿基米德螺旋線為路徑進(jìn)行接種。


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√ 無菌保證:專li設(shè)計(jì)的一次性微量加樣頭能做到真正無菌取樣。無需清潔消毒,杜絕消毒劑殘留帶來的任何可能的假陰性結(jié)果。


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 適用性強(qiáng):特殊設(shè)計(jì)的加樣頭緩沖結(jié)構(gòu),培養(yǎng)基厚度適用范圍大,對(duì)培養(yǎng)基表面平整度無要求。


√ 用途多樣:可在單一平皿中產(chǎn)生1000-10000倍(采用150mm平皿)的濃度梯度,免除連續(xù)稀釋和大量接種過程。除細(xì)菌計(jì)數(shù)外,該儀器也可用于抗菌敏感性測(cè)試(AST)和AEMS實(shí)驗(yàn)。使用線性模式可改善AMES實(shí)驗(yàn)誘變濃度閾值的檢測(cè)。


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