高效液相色譜儀對(duì)檢測(cè)的樣品有哪些要求?
閱讀:893 發(fā)布時(shí)間:2023-2-16
高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
如果高效液相色譜儀的檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器,首先確保樣品具有紫外吸收。如果沒有紫外吸收,可以選擇熒光檢測(cè)器、蒸發(fā)檢測(cè)器等??傊枰獦悠返闹饕煞衷跈z測(cè)器上有一個(gè)響應(yīng)信號(hào)。
高效液相色譜儀測(cè)試前,應(yīng)將樣品制備成一定濃度的溶液(制備溶液時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品的溶解度選擇合適的溶劑。為了減少溶劑峰,通常使用流動(dòng)相作為溶劑,樣品溶液的濃度通常制備為約10微克/毫升)。如果樣品溶解良好且沒有其他雜質(zhì),樣品溶液可直接吸入注射。如果樣品中有其他成分,例如,當(dāng)測(cè)定口服藥物制劑中成分的含量時(shí),口服藥物制劑中通常有其他輔料,樣品溶液在注射前應(yīng)進(jìn)行過濾(通常使用0.22um或0.45um針頭過濾器)