剛果紅染色實驗服務
剛果紅的原理:
剛果紅篩選主要是根據(jù)菌落降解纖維素可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使結合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明因。
剛果紅染色法的使用:
方法一 :先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行焰色反應在長出菌落的培養(yǎng)基上,覆蓋質量濃度為1 mg/ml.的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為I mol/的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCI溶液,此時,產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)透明圈。
(加NaCI的原因:剛果紅是結合到培養(yǎng)基的多糖底物,但分解纖維素的細菌可以產(chǎn)纖維素酶,能分解這個多糖底物成為賽糖,這樣剛果紅就不能結合上去了,氯化鈉就可以使結合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大小不--的透明圈, 大的透明圈分解纖維素的能力就強)。
方法二: 在倒平板時就加入剛果紅配制質量濃度為10 mg/ml的CR溶液,滅菌后,按照每200 ml。培養(yǎng)基加入1 ml。的比例加入CR溶液,混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出茵落后,產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)明顯的透明圈。