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親合性(avidity)是測定抗體和抗原復合物的整體穩(wěn)定性。抗體—抗原相互作用的整體強度受3個主要因素控制:抗體對表位的內(nèi)在親和力、抗體和抗原的結合價以及參與反應成分的立體結構。因為親合性是指整個反應,故可從根本上決定所用免疫化學技術的成敗。
當抗體和抗原形成多價復合物時相互作用的強度顯著增加
大多數(shù)免疫化學步驟包括多價相互作用。所有抗體都是多價的;IgG和大多數(shù)IgA為2價,IgM為10價。抗原可以是多價的,因其含有相同表位的多個拷貝,例如:各種同聚物,或者因為存在可被不同抗體識別的眾多表位。多價相互作用可以顯著地穩(wěn)定免疫復合物,致使反應實際上是不可逆的。
多聚性相互作用甚至可以使低親和力抗體牢固地結合。由于一些方法很可能是多價的相互作用,所以低親和力抗體在一種方法中可能性能良好,但不適用于另一種方法。當抗體在不同方法中顯示這種差別時,經(jīng)常是由于在多價結合中的差異造成的。同樣地,在一種方法中不可測的交叉反應可能干擾其他方法分析的結果。
預測多價的影響通常并不容易,因為反應包括分子的幾何狀排列產(chǎn)生的空間壓縮。然而,多價的影響通過下述的幾個簡單例子來說明:①單克隆抗體與同聚體抗原的相互作用;②多克隆抗體與有多個表位的抗原結合產(chǎn)生大量多聚性復合物;③多克隆抗體與有多個表位的抗原結合形成第二抗體與多聚性結合的靶位;④抗體和固定在固相載體上的抗原結合。這些模式雖在某些方面有差別,但是具有上述例子的基本特征。
單克隆抗體與同聚體抗原的雙價結合增加親合性
同聚體的抗原存在相同的重復表位,促進雙價結合
當單克隆抗體和多聚性抗原結合時,開始的反應是與前面討論的雙分子相互作用相同,抗體通過擴散遇到抗原。然而,反應的第二步是抗體的游離結合位點和保留相同抗原分子上的同樣位點相結合。這個反應是發(fā)生在分子內(nèi)的轉換并不依靠擴散作用。它僅受到構象的限制。這種分子復合物一旦構成,單一的抗體—表位相互作用的解離率與一般雙分子復合物相似。然而, 由于抗原通過另一些相互作用將仍會與之結合時,觀察到的解離將十分緩慢,因此形成非常穩(wěn)定的抗體—抗原復合物。
這種類型的多聚性相互作用在所有免疫化學中都可能發(fā)生。