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技術(shù)文章

豬ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)與原理

閱讀:303          發(fā)布時(shí)間:2021-3-5

豬ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間較好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,較好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)較后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.豬ELISA檢測(cè)試劑盒封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9 .本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

豬ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)原理:

(1).抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

(2).結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

(3).酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。

(4).受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

(5).此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

(6).加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度pg-ng/ml水平,并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特---反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)

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