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單克隆抗體與多克隆抗體的區(qū)別
閱讀:2104 發(fā)布時(shí)間:2021-9-2克隆:指無(wú)性繁殖細(xì)胞系,是由單一的祖先細(xì)胞分裂繁殖而形成的一簇細(xì)胞純系。在這個(gè)家族的所有成員中,如無(wú)突變發(fā)生,基因是*相同的。
單克隆抗體(monoclonal antibodies, mAb):由一個(gè)識(shí)別一種抗原表位的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體。高度均一、特異性強(qiáng)、效價(jià)高、少或無(wú)交叉反應(yīng)性。
多克隆抗體(polyclonal antibody, pAb):用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動(dòng)物,可刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物。
多克隆抗體與單克隆抗體的制備比較
多克隆抗體制備的主要流程包括:①制備抗原;②選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;③動(dòng)物免疫;④試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫;⑤如果成功免疫,處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清;⑥純化出抗體;⑦鑒定抗體,包括純度以及特異性。
與單抗制備的區(qū)別 經(jīng)過(guò)特定抗原處理過(guò)的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合的方法得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選、ELISA檢測(cè)效價(jià)后就得到陽(yáng)性克隆株,最后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)⒓?xì)胞注入到動(dòng)物(一般為balb/c小鼠)腹腔中用腹水培養(yǎng),收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒(méi)有單克隆抗體繁瑣,只需將抗原(純度越高越好)直接注入到動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫,經(jīng)過(guò)3至4次免疫,ELISA測(cè)其效價(jià)合格后,收集血液離心得到上清,純化后即能得到多克隆抗體。因此多抗制備的周期就比單抗制備的短,制備價(jià)格也比單抗要低。
多克隆抗體與單克隆抗體的應(yīng)用比較
(1)多克隆抗體的應(yīng)用
一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗體,包括變性—抗性的表位,所以,在深固定的樣本中也會(huì)發(fā)揮效應(yīng),在石蠟包埋組織切片的染色中,多克隆抗體常選用。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的不同需要,多克隆抗體應(yīng)用于相應(yīng)抗原的標(biāo)記。此外,在農(nóng)業(yè)中,多克隆抗體被用于農(nóng)藥殘留現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè);在臨床應(yīng)用中,多克隆抗體主要用于病原物的檢測(cè)、疾病的診斷及治療,如作為蛋白類免疫抑制劑用于移植反應(yīng)和自身免疫病的治療。
(2)單克隆抗體的應(yīng)用
單克隆抗體可用于分析抗原的細(xì)微結(jié)構(gòu)及檢驗(yàn)抗原抗體未知的結(jié)構(gòu)關(guān)系;出針對(duì)復(fù)雜生物混合物中的特定分子的抗體,可用于分離、分析及純化該特定分子抗原;其試劑可用于臨床診斷和治療,或用于以單抗為彈頭的“生物"藥物,直接導(dǎo)向腫瘤等。自Mathe于1958年首ci將抗鼠白血病免疫球蛋白與氨甲喋呤(MTX)交聯(lián)用于導(dǎo)向治療以來(lái),相繼出現(xiàn)了多種化療藥物與各種抗體的免疫耦合物,藥物與單抗直接交聯(lián)、藥物通過(guò)小分子交聯(lián)劑與單抗連接及藥物通過(guò)大分子載體與單抗相連形成免疫耦合物,促進(jìn)了分子導(dǎo)向藥物的研制工作從實(shí)驗(yàn)室走向臨床并廣泛應(yīng)用于疾病治療。