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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品正確溶解與稀釋

閱讀:374          發(fā)布時(shí)間:2023-11-28

ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子,標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。

標(biāo)準(zhǔn)品正確溶解:

1. 粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。

2. 根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末全溶解。

注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:

1、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:

若血清、血漿、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

2、耗材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫(xiě)上S1-S7、空白。

3、梯度稀釋:根據(jù)說(shuō)明書(shū),每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。

4、空白: 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。

注意:梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),渦旋震蕩混勻后可短暫離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開(kāi)始稀釋下個(gè)濃度。


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