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人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識

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人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識:
① 建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時。
③ 實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
④ 酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標(biāo)本宜在新鮮時檢測,如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結(jié)標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。
⑧ 反復(fù)凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
樣本處理的具體方法
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人ELISA試劑盒血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit    英文名:    Monkey Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA Kit    英文名:    Monkey Vascular endothelial cell growth factor receptor,VEGFR-3/Flt-4 ELISA kit
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA Kit    英文名:    Monkey Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit
性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA Kit    英文名:    Monkey sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA kit
脫氫表雄酮(DHEA)ELISA Kit    英文名:    Monkey Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit
天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA Kit    英文名:    Monkey Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit
瘦素(LEP)ELISA Kit    英文名:    Monkey Leptin,LEP ELISA Kit
腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA Kit    英文名:    Monkey adrenomedullin,ADM ELISA Kit
神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA Kit    英文名:    Monkey Neuronal Nitric Oxide Synthase,nNOS ELISA Kit
神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit    英文名:    Monkey glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA Kit    英文名:    Rhesus thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit
腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit    英文名:    Monkey brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit
內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit    英文名:    Monkey Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit
內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit    英文名:    Monkey Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit
內(nèi)毒素(ET)ELISA Kit    英文名:    Monkey endotoxin,ET ELISA Kit
免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit    英文名:    Monkey Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
類風(fēng)濕因子(RF)ELISA Kit    英文名:    Monkey rheumatoid factor(RF)ELISA Kit
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA Kit    英文名:    Monkey Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α/CCL20 ELISA Kit
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA Kit    英文名:    Monkey Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA kit
膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit    英文名:    Monkey Collagenase I ELISA Kit
甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit    英文名:    Monkey Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA Kit    英文名:    Monkey matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISA Kit
過氧化氫酶(CAT)ELISA Kit    英文名:    Monkey Catalase,CAT ELISA kit
谷胱甘肽還原酶(GR)ELISA Kit    英文名:    Monkey Glutathione Reductase,GR ELISA Kit
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA Kit    英文名:    Monkey glutathione S-transferases,GSTs ELISA Kit
睪酮(T)ELISA Kit    英文名:    Monkey Testosterone(T)ELISA Kit
分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit    英文名:    Monkey secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA Kit    英文名:    Monkey monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF ELISA kit人ELISA試劑盒

 

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