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小鼠ELISA試劑盒驗(yàn)檢測(cè)送樣須知
閱讀:129 發(fā)布時(shí)間:2018-4-23提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 35.6KB |
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小鼠ELISA試劑盒驗(yàn)檢測(cè)送樣須知:
1.常規(guī)項(xiàng)目所需血清用量一般是200ul左右,如有其它項(xiàng)目,可咨詢.另外,在加樣過(guò)程中,會(huì)不可避免的產(chǎn)生正常損耗,請(qǐng)?jiān)诔檠獣r(shí)一定考慮到,正常情況下,請(qǐng)多分200ul.如考慮小試\復(fù)檢或雙管加樣,請(qǐng)加倍計(jì)算。
2.老師對(duì)樣本進(jìn)行流水號(hào)編寫,避免檢測(cè)時(shí)大量的工作量用于分辨排列樣本。
3.上海和南京兩地的客戶可以提供上門取樣服務(wù),請(qǐng)準(zhǔn)備好樣本提前一天我司銷售人員。外地客戶可干冰運(yùn)送樣本。
樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)
影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)
6. 樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃,若不能及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),或-80℃(6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),避免反復(fù)凍融。
8. 如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。
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