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大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA 試劑盒實驗注意事項
閱讀:126 發(fā)布時間:2018-11-16注意: 1、 試劑準(zhǔn)備:準(zhǔn)備一次實驗所需要的酶標(biāo)條,其它的可從微孔板上拆下,密封,按照說明書要求保存,以備下次使用。
2、 加樣:實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。加樣時注意不要有氣泡,將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。加樣或加試劑時,個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。因此,一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進(jìn)行實驗。
3、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時請將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā),洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài),同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時間和溫度。
4、 洗滌:充分的洗滌非常重要,在每次洗滌過程中,都要將洗滌液*甩干。洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實 驗過程中。
5、 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘觀察一次),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
6、 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
7、 如果實驗室內(nèi)濕度低于60%,推薦使用加濕器提高濕度水平。