人腫瘤壞死因子alpha

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細胞培養(yǎng)基的概念及基本構成：

細胞培養(yǎng)現在已成為應用于生命科學的主要技術之一，它是從生物機體中取出部分組織分散成單個細胞或直接從機體取出單個細胞，并將它們在有利于生長的人工環(huán)境中培養(yǎng)的統(tǒng)稱。

細胞培養(yǎng)基通常包括適當的細胞能量來源和調節(jié)細胞周期的化合物。一個典型的培養(yǎng)基還需要補充氨基酸，維生素，無機鹽，葡萄糖和血清，以提供生長因子，激素和附著因子。除了營養(yǎng)外，培養(yǎng)基也有助于保持培養(yǎng)體系中的pH值和滲透壓平衡。動物細胞體外培養(yǎng)中最關鍵的步驟之一即為選擇適當的細胞培養(yǎng)基，生物制品的制備和生產均需要依賴細胞培養(yǎng)基，細胞培養(yǎng)基是生物制品生產的關鍵核心原材料。

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常用的細胞培養(yǎng)基：

1、BME細胞培養(yǎng)基

基礎Eagle培養(yǎng)基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle設計，BSS＋12種氨基酸8種維生素。簡單、便于添加，適于各種傳代細胞系和特殊研究用，在此基礎上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。

2、MEM細胞培養(yǎng)基

又稱Eagle培養(yǎng)基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基礎培養(yǎng)基（BME）上修改而來，刪去賴氨酸、氨基酸濃度增加，適合多種細胞單層生長，有可高壓滅菌品種，是一種最基本、試用范圍的培養(yǎng)基，但因其營養(yǎng)成分所限，針對生產之特定細胞培養(yǎng)與表達時，并不一定是使用的培養(yǎng)基。

3、DMEM細胞培養(yǎng)基

DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基，由MEM培養(yǎng)基改良而來，起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

細胞培養(yǎng)基的種類與基本成分：

一、天然培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術建立早期，體外培養(yǎng)細胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸被合成培養(yǎng)基所替代。

二、小牛血清

用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細胞的原因主要是來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。

牛血清分為小牛血清、新生牛血清、胎牛血清。小牛血清取自出生 10～30 天的小牛；新生牛血清取自出生 24 小時之內的新生牛；胎牛血清應取自剖腹產的胎牛。顯然，胎牛血清是高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清中含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。
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