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以牛血清白蛋白為模型,制備納米脂質(zhì)體,旨在其包封率低穩(wěn)定性差等問題,為開發(fā)好,生物利用度,服用的蛋白質(zhì)制劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
步驟一:采用逆相蒸發(fā)法制備納米脂質(zhì)體。以大豆卵磷脂、為膜材,(2:3,V:V)為有機(jī)相,含吐溫-80的磷酸鹽緩沖液為水合介質(zhì);利用透析法測(cè)包封率,動(dòng)態(tài)光散射粒度分布儀測(cè)粒徑,Zeta電位儀測(cè)電位;并以包封率和粒徑作為指標(biāo),經(jīng)星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面實(shí)驗(yàn),確定了制備納米脂質(zhì)體的。為:與卵磷脂的質(zhì)量比為9:20;牛血清白蛋白濃度為10mg/ml;外水相表面活性劑濃度為1%;內(nèi)水相與有機(jī)相體積比1:2。按該制得的終產(chǎn)品平均粒徑為176.0±2.2nm,包封率為59.8±1.4%,Zeta電位為-38.76±0.25mV。
步驟二:分別用PEG2000、PEG4000、PEG6000和PVP對(duì)納米脂質(zhì)體進(jìn)行了表面修飾,考察了修飾材料與卵磷脂的比例變化對(duì)其離心沉降率、Zeta電位、粒徑、包封率和酸堿穩(wěn)定性的影響。確定了選用3%的PEG2000進(jìn)行表面修飾,修飾后的納米脂質(zhì)體形狀為規(guī)整的球形,平均粒徑為177.0±2.3nm,Zeta電位為-38.54±0.08mV,氧化指數(shù)為0.187,包封率為67.5%,能夠在胃液和腸液中穩(wěn)定存在48h。
研究結(jié)果充分表明,采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法能?夠準(zhǔn)確反映多因素、多水平的交互影響,按照該法篩選的制備方案能提包封率。此外,經(jīng)PEG2000修飾的納米脂質(zhì)體粒徑小、包封率,,在胃腸pH值下穩(wěn)定。
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