辣根過氧化物(HRP)在分子生物學中用于檢測復合物和生物靶標，如蛋白質、碳水化合物和核酸。HRP通常與抗體、鏈霉親和素或其他蛋白質結合，將一些既易測定又具有度性的物質如HRP，F(xiàn)ITC，Biotin等標記到特異性抗體分子上，可以通過這些標記物的增放大效應來顯示或定量反應中抗原或抗體的性質與含量。

過氧化物（HRP）標記單克隆抗體的步驟包含：

1.透析膜依次浸泡于50%乙醇1h，10 mmol/L NaHCO31h, 1 mmol/L EDTA 1 h,在蒸餾水中洗兩次并放于含0.01% (m/V)疊氮鈉的0. 1 mol/L磷酸鈉緩沖液，于4℃保存。

2.≥1 mg/ml抗體溶液(A280=1. 44 mg IgG/ml)對2L 0.1 mol/L pH 6.8的磷酸鈉緩沖液透析，于4℃緩慢攪動下過夜。

3.10mgHRP溶解于1ml0.1mol/LpH9.2的碳酸鹽緩沖液，取0.25ml加入0.25ml配制的1.71 mg/ml NaIO4溶液中，蓋緊混勻，于室溫下避光放置2h。

4.取1ml透析后的抗體溶液和0.25g SephadexG-25加至0.5mlHRP/NaIO4混合液中。用玻璃棉塞緊巴斯德吸管管尖并用Parafilm封口膜封好。將抗體/葡聚糖凝膠/HRP混合物加人巴斯德吸管，室溫下避光放置3h。

5.柱子用0.75ml碳酸鹽緩沖液洗脫偶聯(lián)物。加38μl5mg/mlNaBH4溶液至洗脫物中，室溫下避光孵育30min。再加112μl 5mg/ml NaBH4溶液繼續(xù)孵育60min。

6.加0.9ml飽和硫酸銨溶液，于4℃下溫和攪拌30min。于4℃，10000g離心15min。

相關產(chǎn)品：

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Boc-氨基氧基-PEG2-溴化物  Boc-Aminooxy-PEG2-bromide

疊氮化物-C2-SS-C2-  Azide-C2-SS-C2-biotin

-PEG3-SS-疊氮化物  Biotin-PEG3-SS-azide

BCN-PEG3-      BCN-PEG3-Biotin

四嗪-PEG5-SS-胺      Tetrazine-PEG5-SS-amine

Boc-氨基-PEG3-SSPy   Boc-amino-PEG3-SSPy

THP-SS-PEG1-Tos

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以上內(nèi)容均為瑞禧生物提供zhq2022.2