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ROS活性氧檢測的機(jī)理分析

時(shí)間:2023-3-24閱讀:256

活性氧檢測試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)(CAT# 50101ES01)是一種基于熒光染料DCFH-DA (2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate)的熒光強(qiáng)度變化,定量檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧水平方法。


DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能透過細(xì)胞膜,從而使探針很容易被標(biāo)記聚集在細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧能夠氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。DCF綠色熒光強(qiáng)度與細(xì)胞內(nèi)活性氧水平成正比,檢測DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。


在激發(fā)波長488 nm,發(fā)射波長525 nm條件下,使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測DCF熒光,從而測定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。

微信截圖_20230324162006.png

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