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當(dāng)前位置:西安瑞禧生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>膠體金(納米金)的詳細(xì)制備步驟介紹及應(yīng)用
西安瑞禧生物科技有限公司是的納米金及其功能化試劑商,我公司提供納米金的制備方法如下:
制備準(zhǔn)備:
氯金酸(HAuC14)是主要還原材料,還原劑有檸檬酸鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷、硼氫化鈉等。根據(jù)還原劑類型以及還原作用的弱,可以制備0.8 nm~150 nm不等的膠體金。的制備方法為檸檬酸鹽還原法
操作方法:
(1)將HAuC14先配制成0.01%水溶液,取100 mL加熱沸。
(2)攪動(dòng)下準(zhǔn)確加入一定量的1%檸檬酸三鈉(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液。
(3)繼續(xù)加熱煮沸15 min。此時(shí)可觀察到淡黃色的氯金酸水溶液在檸檬酸鈉加入后很快變灰色,續(xù)而轉(zhuǎn)成黑色,隨后逐漸穩(wěn)定成紅色。全過程約2~3 min。
(4)冷卻室溫后用蒸餾水恢復(fù)原體積。
用此法可制備16~147 nm粒徑的膠體金。金顆粒的大小取決于制備時(shí)加入的檸檬酸三鈉的量。
注意事項(xiàng)
● 氯金酸易潮解,應(yīng)干燥、避光保存。
● 氯金酸對(duì)金屬有烈的腐蝕性,因此在配制氯金酸水溶液時(shí),不應(yīng)使用金屬匙稱量氯金酸。
● 用于制備膠體金的蒸餾水應(yīng)是雙蒸餾水或三蒸餾水,或者是的去離子水。
● 是以制備膠體金的玻璃容器是清潔的,用前應(yīng)先經(jīng)酸洗并用蒸餾水沖凈。是經(jīng)硅化處理的,硅化方法可用5%二氯甲硅烷的氯仿溶液浸泡數(shù)分鐘,用蒸餾水沖凈后干燥備用。
● 膠體金的鑒定和保存:膠體金的制備并不難,但要制好的膠體金卻也并非易事。因此對(duì)每次制好的膠體金應(yīng)加以檢定,主要檢查指標(biāo)有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。
肉眼觀察是基本也是簡(jiǎn)單和的檢定方法,但需要一定的經(jīng)驗(yàn)。的膠體金應(yīng)該是清亮透明的,若制備的膠體金混濁或液體表面有漂浮物,提示此次制備的膠體金有較多的凝集顆粒。在日光下仔細(xì)觀察比較膠體金的顏色,可以粗略估計(jì)制得的金顆粒的大小。當(dāng)然也可用分光光度計(jì)掃描λmax來估計(jì)金顆粒的粒徑。結(jié)制備的膠體金作電鏡觀察,并選一些代表性的作顯微攝影,可以比較地測(cè)定膠體金的平均粒徑。 膠體金在潔凈的玻璃器皿中可較長(zhǎng)時(shí)間保存,加入少許劑(如0.02%NaN3)可有利于保存。保存不當(dāng)時(shí)會(huì)有或有凝集顆粒形成。少量凝集顆粒并不影響以后膠體金的標(biāo)記,使用時(shí)為提標(biāo)記效率可先低速離心去除凝集顆粒。
1、納米金在電鏡水平的應(yīng)用
納米金應(yīng)用電鏡水平的研究早,快,應(yīng)用。其大是可以通過應(yīng)用不同大小的顆?;蚪Y(jié)合標(biāo)進(jìn)行雙重或多重標(biāo)記。直徑為3~15nm 膠體金均可用作電鏡水平的標(biāo)記物。3~15nm 的膠體金多用于單一抗原顆粒的檢測(cè),而直徑15nm 多用于檢測(cè)量較多的。
納米金用于電鏡水平的研究,主要包括:①懸液或單層培養(yǎng)中表面抗原的觀察。②單層培養(yǎng)中內(nèi)抗原的檢測(cè)。③組織抗原的檢測(cè)。
金標(biāo)記在電鏡水平的應(yīng)用,主要方法包括:包埋前染色、包埋后染色、負(fù)染色、雙標(biāo)記技術(shù)和原位雜交技術(shù)等。
實(shí)驗(yàn)證明,該法樣本用量少、檢測(cè)速度快、對(duì)比、、性和特異性,既可用于抗原檢測(cè),也可用于抗體檢測(cè),因此,可同時(shí)適用于科研和。
?。病⒓{米金在光鏡水平的應(yīng)用
膠體金同樣可用做光鏡水平的標(biāo)記物,傳統(tǒng)的熒光素、等。涂片、切片均可應(yīng)用。主要用于:①用單克窿抗體或抗血清檢測(cè)懸液或培養(yǎng)的單層的膜表面抗原。②檢測(cè)培養(yǎng)的單層胞內(nèi)抗原,③組織中或亞薄切片中抗原的檢測(cè)。
納米金用于光鏡水平的研究,可以彌補(bǔ)其它標(biāo)記物不可避免的本底過和內(nèi)部活性干擾等缺點(diǎn)。
?。场⒓{米金在流式儀中的應(yīng)用:
應(yīng)用熒光素標(biāo)記的抗體,通過流式儀計(jì)數(shù)分析表面抗原,是學(xué)研究中的技術(shù)之一。但由于不同熒光素的光譜相互重疊,區(qū)分不同的標(biāo)記困難,因此尋找一種非熒光素標(biāo)記物,用于流式計(jì)數(shù)。這樣可以同時(shí)進(jìn)行幾種標(biāo)記。該標(biāo)記物能夠改變散射角,納米金可以地改變紅激光散射角,因而可以作為流式儀的標(biāo)記物之一。
?。?、凝集試驗(yàn):?jiǎn)畏稚⒌慕鹑苣z呈清澈透明的溶液,其顏色隨溶膠顆粒大小而變化,當(dāng)與相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生專一性反應(yīng)后出現(xiàn)凝聚,溶膠顆粒增大,光散射隨之發(fā)生變化,顆粒也會(huì)沉降,溶液的顏色變淡甚變成無色,這一原理可定性或定量地應(yīng)用于反應(yīng)。
?。?、印跡技術(shù)(immunoblotting):印跡是一種較的化學(xué)技術(shù)。用聚丙烯酰胺凝膠電泳將蛋白質(zhì)分離,得到的區(qū)帶轉(zhuǎn)移硝酸纖維素膜,然后用法(或熒光、RIA)進(jìn)行定量。
納米金也可用于該法的定量。轉(zhuǎn)移后的硝酸纖維素膜與某特異性的抗體保溫后,再與經(jīng)葡萄球菌A蛋白致敏的膠體金溫育,*洗去多余的膠體金,根據(jù)膜上膠體金顆粒顏色深淺可測(cè)知樣品中的特異性抗原。
利用金顆??纱呋y離子還原成金屬銀這一原理,采用銀顯影劑增金顆粒的可見性,可提測(cè)定靈敏度,檢測(cè)下限可低 0.1ng,這種金銀染色法應(yīng)用已日趨。
由于納米金印跡技術(shù)、,且有相當(dāng)?shù)牡撵`敏度,在上有的應(yīng)用。
?。?、納米金在肉眼水平的應(yīng)用
納米金傳統(tǒng)三大標(biāo)記物,用于肉眼水平的檢測(cè)中。除了納米金本身具有的特點(diǎn)外,還有以下:①試劑和樣本用量小,樣本量可低1~2ul;②不需γ-計(jì)數(shù)器、熒光顯微鏡、標(biāo)檢測(cè)儀等貴重儀器,適于現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用; ③沒有諸如放射性同位素、鄰苯二胺等有害物質(zhì)參與;④實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以保存;⑤時(shí)間縮短,提了檢測(cè)速度。金標(biāo)過程中,無共價(jià)鍵形成,是一定離子濃度下的物理吸附。因此幾乎的大分子物質(zhì)都可被金標(biāo)記,標(biāo)記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,膠體金的性可 ELISA的水平。而結(jié)合銀染色時(shí),檢測(cè)的性提。
以上信息是由瑞禧生物科技有限公司提供,我公司納米金試劑以及功能化納米金試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品可被應(yīng)用于探針、印跡、、傳送等等。
西安瑞禧生物科技有限公司可以提供系列納米試劑產(chǎn)品:
1.納米金粒子產(chǎn)品Gold nanoparticles及其功能化衍生試劑-常規(guī)濃度0.1mg/ml
2. Silver Nanoparticles銀納米產(chǎn)品及其衍生試劑:
3.磁性納米顆粒及其相關(guān)產(chǎn)品,順磁性納米顆粒
4. Polystyrene Beads聚苯乙烯微球
產(chǎn)品列表:
瑞禧生物-金納米系列產(chǎn)品分類:
Spherical Gold Nanoparticle普通的球形金納米粒子(低濃度)
Gold Nanoparticles Amine Function氨基功能化的金納米粒子
Gold Nanoparticles Carboxyl Function羧基功能化的金納米粒子
Gold Nanoparticles Biotin Function功能化的金納米粒子
Gold Nanoparticles Metheyl Function 甲基化金納米粒子
Gold Nanoparticles NHS Function 活化脂功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Maleimide Function馬來亞胺功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Neutravidin Function中性親和素功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Streptavidin Function鏈親和素功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Protein A Function蛋白A功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Galactose Function半乳糖功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Transferrin Functions轉(zhuǎn)鐵蛋白功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Goat Anti-Human IgG Function抗體功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Goat Anti-Mouse IgG Function抗體功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Goat Anti-Rabbit IgG Function抗體功能化金納米粒子
Gold Nanoparticles Polystyrene Polymer Function聚苯乙烯聚合物金納米粒子
Fluorescent labeled Gold Nanoparticles熒光素標(biāo)記的納米金 熒光素包括有FITC RB CY3 CY5 納米金粒徑15-50nm
PEGylated functionalized gold nanoparticles聚乙二醇金納米粒子(PEG末端連NH2,COOH,MAL,NHS,Biotin等等)
mesoporous silica nanoparticles, s單分散介孔氧化硅納米顆粒(可修飾熒光分子和NH2/COOH功能基團(tuán))
瑞禧生物-銀納米系列產(chǎn)品分類:
Spherical Silver Nanoparticle普通球形銀納米粒子:
Anti Silver Nanoparticle Conjugates抗體銀納米粒子交聯(lián)產(chǎn)品
Protein A Silver Nanoparticle Conjugates 蛋白銀納米粒子交聯(lián)產(chǎn)品
PEG Silver Nanoparticle Conjugates聚乙二醇銀納米粒子交聯(lián)產(chǎn)品
Gold Silver Alloy Nanoparticles金銀合體納米粒子
瑞禧生物-Magnetic Nanoparticles磁性納米顆粒分類:
Magnetic Nanoparticles普通磁性納米顆粒
Superparamagnetic Iron Oxide nanoparticles順磁性氧化鐵納米粒子
oleic acid coating Fe3O4 Magnetic Nanoparticles油酸包裹的磁性納米顆粒
SiO2 coated Fe3O4 Magnetic Nanoparticles二氧化硅包裹的磁性納米粒子產(chǎn)品
BSA coated Fe3O4 Magnetic Nanoparticles 牛血清白蛋白包裹的磁性納米顆粒
PLL coated Fe3O4 Magnetic nanoparticles多聚賴氨酸包裹的四氧化三鐵磁性納米顆粒
PEI coated Fe3O4 Magnetic nanoparticles聚乙烯亞胺包裹的四氧化三鐵磁性納米顆粒
PLGA/PCL/PLA coating Fe3O4 Magnetic Nanoparticles 生物降解材料包裹磁性納米顆粒
Adriamycin coating Fe3O4 Magnetic Nanoparticles 阿霉素包裹磁性納米顆粒
magnetic mesoporous silica nanoparticles(M-s)介孔二氧化硅磁性納米顆粒(可修飾熒光分子和NH2/COOH功能基團(tuán))
PEG Fe3O4 Magnetic nanoparticles (PEG末端連NH2,N3,MAL, Biotin,COOH等等)
Anti-Fe3O4 Magnetic nanoparticles 抗體交聯(lián)磁性納米顆粒
表面基團(tuán)功能化Superparamagnetic Iron Oxide nanoparticles順磁性氧化鐵納米粒子(基團(tuán)有NH2,COOH,OH,MAL,Biotin等等)
Fluorescent labeled Magnetic Nanoparticles熒光標(biāo)記磁性納米顆粒(FITC,RB,CY3,CY5)
Bioconjugated Magnetic Nanoparticles生物蛋白磁性納米顆粒(Concanavilin A Transferrin
Protein A,Protein G,Folic Acid,RGD,半乳糖,葡聚糖、Streptavidin、Lysozyme、Hylauronic acid、Insulin、Chitosan)
四氧化三鐵磁性納米微球Fe3O4 Magnetic Microspheres
功能化四氧化三鐵磁性納米微球Fe3O4 Magnetic Microspheres
瑞禧生物-Polystyrene Beads聚苯乙烯微球分類:
Polystyrene Beads常規(guī)聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, carboxyl function羧基能化聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, Amine function 氨基化聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, Biotin function 化聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, streptavidin coated鏈親和素聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, BSA coated牛血清白蛋白聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, FITC labeled熒光素標(biāo)記聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, Rhodamine labeled 羅丹明標(biāo)記的聚苯乙烯微球
Polystyrene beads, Cy3 labeled CY3標(biāo)記的聚苯乙烯微球
Fluorescein labeled polystyrene beads, amine function 熒光素標(biāo)記的聚苯乙烯微球附氨基功能
Rhodamine labeled polystyrene beads, amine function羅丹明標(biāo)記的聚苯乙烯微球附氨基功能
Cy3 labeled polystyrene beads, amine function Cy3標(biāo)記聚苯乙烯微球附氨基功能
瑞禧生物-Gold Nanorods金納米棒產(chǎn)品分類:
Gold Nanorod, SPR peak金納米棒
Gold Nanorod, Amine functional 氨基化金納米棒
Gold Nanorod, Carboxyl functional 羧基化金納米棒
Gold Nanorod, Hydroxyl functional 羥基化金納米棒
Gold Nanorod, methyl functional 甲基化金納米棒
Gold Nanorod, Biotin Labeled 金納米棒
Gold Nanorod, Azide functional 疊氮金納米棒
Gold Nanorod, PEG Coated 聚乙二醇金納米棒
瑞禧生物-Functional Agarose Beads功能性瓊脂糖珠
Agarose beads, Aldehyde activated
Agarose beads, CDI activated
Agarose beads, CNBr activated
Agarose beads, Epoxy activated
Agarose beads, hydrazide functional
Agarose beads, Iodoacetyl functional
Agarose beads, pyridyl disulfide functional
Agarose beads, boronic acid functional
Agarose beads, amine functional
Agarose beads, carboxylic functional
Agarose beads, thiol functional
Agarose beads, maleimide functional
Agarose beads, NTA functional
Agarose beads, azide functional
Agarose beads, alkyne functional
Agarose beads, DBCO functional
Agarose beads, PEG functional
Agarose beads, glucose functional
Agarose beads, mannose functional
Agarose beads, Biotin Labeled
Agarose beads, Streptavidin Labeled
Agarose beads, Protein A Labeled
Agarose beads, Protein G Labeled
瑞禧生物-Fluorescent Quantum Dots熒光量子點(diǎn)
CdSeS/ZnS core熒光量子點(diǎn)
表面基團(tuán)功能化CdSeS/ZnS core熒光量子點(diǎn)
InP/ZnS core熒光量子點(diǎn)
PEG功能化InP/ZnS core熒光量子點(diǎn)
CuInS2/ZnS core熒光量子點(diǎn)
PEG功能化CuInS2/ZnS core熒光量子點(diǎn)
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