目的：觀察40%乙醇灌胃對小鼠缺氧耐受性的影響。方法：將ICR小鼠分為乙醇組和對照組，分別以40%乙醇、生理鹽水灌胃，將2組鼠置于密閉瓶內(nèi)記錄存活時間，比較組間平均存活時間的差異，記錄乙醇組進入醉酒與醉酒持續(xù)時間、并觀察乙醇灌胃后小鼠心率和呼吸的變化。結(jié)果：以40%乙醇灌胃后實驗組小鼠平均存活時間較對照組顯著延長（p<0.01）；實驗組灌胃后約13.11分鐘進入醉酒狀態(tài)，同時心率和呼吸頻率均較對照組明顯下降（p<0.05）。結(jié)論：以40%乙醇灌胃能明顯提高小鼠對缺氧的耐受性，耐受性的提高可能與醉酒后活動降低、心率降低等造成的耗氧減少有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】  缺氧耐受性  乙醇  心電圖  小鼠
【中圖分類號】R965                  【文獻標識碼】A                    【文章編號】2095-1752（2013）11-0046-02
        缺氧是造成細胞損傷的常見的原因，其發(fā)生與休克、心力衰竭、呼吸衰竭等病理過程及綜合征密切相關(guān)，是引起機體功能和代謝異常的基本機制之一。而飲酒也是日常生活中常見的現(xiàn)象，醉酒駕車造成的交通意外往往使人們較多關(guān)注酒精對于機體功能的影響，尤其是對心臟、肝臟等組織器官結(jié)構(gòu)與功能的影響方面[1-2]，醉酒對機體缺氧時的耐受性是否有影響尚少有研究。本實驗旨在探討在醉酒的情況下小鼠的缺氧耐受性的變化，并動態(tài)觀察心電圖等的改變，分析醉酒后缺氧耐受性變化的可能機制。 
        1  材料和方法
        1.1 實驗動物
        健康成年ICR小鼠100只，雌性51只，雄性49只，體重(20±2)g，購自蘇州大學實驗動物中心。
        1.2儀器與試劑
        Medlbab生物信號采集處理系統(tǒng)（南京美易科技有限公司），電子天平，廣口瓶(125mL)，鈉石灰（上海五四化學試劑有限公司，批號110118），無水乙醇，0.9%氯化鈉注射液。
        1.3 方法
        1.3.1 40%乙醇灌胃對小鼠缺氧耐受性的影響
        54只小鼠隨機分為兩組：乙醇組30只、生理鹽水對照組24只，每組雌雄各半。實驗前12h停止給小鼠喂食（以下實驗喂食相同）。按0.15ml/10g體重的量，以40%的乙醇溶液[3]給乙醇組小鼠灌胃、以生理鹽水給對照組小鼠灌胃，立即所有小鼠置于含30g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)，蓋緊瓶塞，記錄小鼠存活時間。
        1.3.2 40%乙醇灌胃對小鼠心電圖的影響觀察
        22只小鼠隨機分為2組：40%乙醇組12只和生理鹽水對照組10只，每組雌雄各半。
        在安靜、光線柔和及25℃的實驗室中，打開心電測量裝置，預(yù)熱30min。按上面1.3.1所述，分別以40%乙醇溶液或生理鹽水溶液給兩組小鼠灌胃，立即將小鼠仰臥位固定于木制小鼠解剖臺上，針狀電極插入兩前肢及左后肢遠心側(cè)皮下，連接Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)，每隔5min自動描記小鼠心電圖，每次連續(xù)采樣5sec。
        1.3.3 40%乙醇灌胃對小鼠醉酒狀態(tài)及呼吸活動的影響觀察
        24只小鼠隨機分為2組：40%乙醇組13只（雌性7只，雄性6只）和生理鹽水對照組11只（雌性6只，雄性5只）。先計數(shù)各鼠呼吸頻率，再按上面1.3.1所述，分別以40%乙醇或生理鹽水給兩組小鼠灌胃，以小鼠翻正反射消失判斷為醉酒，在醉酒狀態(tài)下每隔10min計數(shù)呼吸頻率，取平均值。生理鹽水組計數(shù)灌胃后10min、20min和30min的呼吸頻率，取平均值。
        1.4 統(tǒng)計學處理
        統(tǒng)計學處理采用SAS9.1軟件進行數(shù)據(jù)處理和分析。采用t檢驗分析兩組間差異，方差不齊者采用秩和檢驗分析，P<0.05為有統(tǒng)計學意義。
        2  結(jié)果
        2.1 40%乙醇灌胃對小鼠缺氧存活時間的影響（表1）
        表1  40%乙醇灌胃對小鼠缺氧存活時間的影響（x-±s）
        
        ﹡ 與生理鹽水組比較：P<0.01
        結(jié)果表明，40%乙醇灌胃后小鼠在缺氧情況下存活時間顯著長于生理鹽水對照組，p值<0.01，差異有顯著統(tǒng)計學意義。而雌、雄性小鼠間的存活時間無顯著差異。
        2.2 40%乙醇灌胃對小鼠心率的影響（圖1）
        
        ﹡與灌胃后5min比較：P<0.05；△與生理鹽水組比較：P<0.05
        圖1  40%乙醇灌胃對小鼠心率的影響
        由圖1可見， 40%乙醇組在灌胃后15min心率下降，尤其在30min后明顯低于生理鹽水對照組（P<0.05）；組內(nèi)比較，以40%乙醇灌胃后5min時的心率作為對照，25min、30min、35min、40min時的心率明顯降低，且差別有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。
        1.3  40%乙醇灌胃對小鼠醉酒狀態(tài)及呼吸活動的影響
        小鼠以40%乙醇灌胃后平均13.11±7.59min進入醉酒狀態(tài)，醉酒持續(xù)時間平均112.67±35.06min。對灌胃后兩組小鼠呼吸頻率計數(shù)結(jié)果見表2。
        表2  40%乙醇灌胃對小鼠呼吸的影響（x-±s）
        
        ﹡與生理鹽水組比較：P<0.05；△與灌胃前比較P<0.05
        由表2結(jié)果顯示，灌胃前，兩組間呼吸無明顯差異，而乙醇灌胃后小鼠呼吸頻率顯著低于生理鹽水對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。并且40%乙醇灌胃前后的呼吸頻率亦有差異，灌胃后小鼠呼吸顯著減慢（P<0.05）?？梢姷叫∈笞砭坪蠛粑疃燃由?。
        3  討論
        缺氧是常見的病理過程之一，也是造成細胞損傷的常見原因。機體缺氧耐受性的高低與代謝耗氧率和機體的代償能力有關(guān)，耗氧率高者缺氧耐受性差。許多因素能夠影響到機體的耗氧率，如中樞神經(jīng)活動、體溫和心率等，而本文則研究乙醇對于小鼠缺氧耐受性的影響。
        實驗結(jié)果顯示，40%乙醇灌胃確能顯著延長小鼠在缺氧狀態(tài)下的存活時間，提示其能提高小鼠對缺氧的耐受性。分析40%乙醇灌胃后不同性別小鼠間缺氧耐受性的差別，雖雌鼠存活時間有長于雄性小鼠的傾向，但尚無統(tǒng)計學意義。
        為分析40%乙醇灌胃提高小鼠缺氧耐受性的可能機制，通過動態(tài)描記小鼠灌胃后540min的心電圖，進一步分析后小鼠心率的變化。結(jié)果顯示，40%乙醇灌胃后小鼠心率明顯減慢，心率減慢可使心肌耗氧量有所減少。對給乙醇后實驗動物心率的變化，不同學者的研究結(jié)果不盡相同，有的顯示急性乙醇中毒后可使心率加快[5]，也有報道對心率無明顯影響[6]，可能與實驗對象、乙醇的濃度、用量、給予途徑和觀察時間等多因素有關(guān)。
        本實驗在醉酒狀態(tài)下觀察到小鼠呈現(xiàn)深慢呼吸，提示呼吸活動的耗氧量可能并未顯著減少，而小鼠處于安靜狀態(tài)，肢體自主活動顯著減少，心率減慢等與中樞神經(jīng)活動受抑制有關(guān)。因而乙醇灌胃后，小鼠缺氧耐受性的提高應(yīng)與中樞神經(jīng)活動受抑制、心臟活動減弱以及四肢肌肉運動減少使總耗氧量減少有關(guān)。
        本研究發(fā)現(xiàn)給予40%乙醇能顯著延長小鼠缺氧時的存活時間并動態(tài)監(jiān)測此過程引起的小鼠心率和呼吸的變化，類似結(jié)果較少見到文獻報道。這為研究乙醇對于機體的影響打開了一個新的視角。
        此外，目前在基礎(chǔ)醫(yī)學實驗教學中，缺氧耐受性實驗常采用氯丙嗪結(jié)合低溫的方法觀察其對小鼠缺氧耐受性的影響，但往往難以取得滿意而穩(wěn)定的效果，選用其他臨床使用的麻醉劑又因家對麻醉藥管控制度造成來源的困難。本文以乙醇灌胃來建立模型具有簡便、經(jīng)濟、結(jié)果穩(wěn)定的優(yōu)點，可為基礎(chǔ)醫(yī)學實驗教學中缺氧耐受性的觀察提供新的模型，具有明顯的實用價值。

參考文獻
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江蘇省高等教育改革課題（編號：SG315935）