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當(dāng)前位置:上海乾思生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>雌二醇ELISA試劑盒 種屬多樣完備
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則: 2 瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至 1ml ,蓋好后靜置 10 分鐘以上,然后反復(fù)顛倒 / 搓動(dòng)以助溶解,其濃度為 300 pg/ml ,做系列倍比稀釋后,分別稀釋 300 pg/ml , 150 pg/ml , 75 pg/ml , 37.5 pg/ml , 18.5 pg/ml , 9 pg/ml , 4.5 pg/ml ,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度 0 pg/ml ,臨用前 15 分鐘內(nèi)配制。 如配制 150 pg/ml 標(biāo)準(zhǔn)品:取 0.5ml (不要少于 0.5ml ) 300 pg/ml 的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含 0.5ml 樣品稀釋液的 Eppendorf 管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則: 臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔 100 μ l ),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 生物素標(biāo)記抗體加 990 μ l 生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則: 臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔 100 μ l ),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加 990 μ l 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
人類成纖維細(xì)胞(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
雌二醇ELISA試劑盒
檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類:進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
引起 ELISA 測(cè)定結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)不一致的原因主要有三點(diǎn),試劑因素、標(biāo)本因素和操作因素。 ●試劑因素:●1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)有差異,還有抗體、檢測(cè)方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會(huì)導(dǎo)致對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果不一致。如:有的廠家酶標(biāo)板孔間 CV 值大于 20%,標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號(hào)和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,選擇剛出廠的試劑盒為宜。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標(biāo)范圍,用一種指標(biāo)來(lái)冒充其它指標(biāo),造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。 ●標(biāo)本因素和操作因素:● 血清是常用的 ELISA 標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
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編輯:小檀20181011
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