核酸檢測PCR實驗室的建設(shè)要點

一、核酸檢測實驗室介紹

核酸檢測實驗室是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法，也是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的實驗技術(shù)。實驗室通常分為四個區(qū)域，即：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、核酸配制和擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)(如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并)。進(jìn)入各個區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行(單向走廊)，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時，不得將工作服帶出。

普通PCR實驗室主要功能用房關(guān)鍵設(shè)備配置如下：

二、核酸檢測實驗室建設(shè)要點

1、實驗室室內(nèi)設(shè)計參數(shù)

通常PCR實驗室沒有嚴(yán)格的凈化要求，需根據(jù)實驗內(nèi)容確定實驗室潔凈度。當(dāng)PCR實驗樣品需要保護(hù)時，實驗室應(yīng)設(shè)潔凈空調(diào)系統(tǒng)。對于2019-nCoV核酸檢測實驗室，建議設(shè)置10萬級凈化。

2、氣流組織建議

（1）氣流組織宜采用上送下排，送風(fēng)口和排風(fēng)口布置應(yīng)使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到最小程度。

（2）在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設(shè)送風(fēng)口。

（3）高效過濾器排風(fēng)口應(yīng)設(shè)在室內(nèi)被污染風(fēng)險最高的區(qū)域，單向布置，不得有障礙。

（4）不能以回（排）風(fēng)夾墻代替排風(fēng)直管，排風(fēng)高效過濾裝置與排風(fēng)總管的連接必須全部是實體風(fēng)管。

三、實驗室建設(shè)的幾個關(guān)鍵點

1、生物安全：按照病毒實驗室生物安全指南（第二版）的規(guī)定，病原體暫按照第二類病原微生物進(jìn)行管理，則樣本植被區(qū)宜為負(fù)壓或加強(qiáng)型P2實驗室，核酸操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

關(guān)鍵技術(shù)措施包括：

（1）絕對負(fù)壓（避免室內(nèi)潛在污染外泄）。

（2）氣流組織（室內(nèi)定向流，從低污染風(fēng)險區(qū)流向高污染風(fēng)險區(qū)）。

（3）排風(fēng)無害化處理（高效過濾、高空排放）。

2、平面布局：不論是組合式還是分散式布置的PCR實驗室，各功能房間均宜設(shè)置獨立緩沖間。

3、區(qū)域空氣流向：為避免交叉污染，PCR實驗室空氣流向必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即智能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)—標(biāo)本制備區(qū)—擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)—擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。

4、通風(fēng)空調(diào)：為避免交叉污染，各功能用房的空氣不能摻混?；旌鲜絇CR實驗室宜采用全新風(fēng)直流式空調(diào)系統(tǒng)；當(dāng)采用全新風(fēng)系統(tǒng)有困難時，每區(qū)的空氣只能在其室內(nèi)自循環(huán)。

四、核酸檢測實驗室關(guān)鍵點

1、裝飾裝修

材質(zhì)：隔墻及吊頂——凈化彩鋼板、地面——同質(zhì)透芯PVC地板、凈化實驗室專用門、觀察窗。

要求：

（1）墻面：光潔、不產(chǎn)塵積塵、耐腐蝕，易清潔消毒、無縫隙。

（2）地面：防靜電、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏。

（3）陰陽角：均用圓弧角密封處理。

（4）門：必須設(shè)置自動互鎖(機(jī)械或電子)。

2、凈化空調(diào)、通風(fēng)系統(tǒng)、自控系統(tǒng)

（1）避免交叉污染，采用全新風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)。

（2）樣品制備區(qū)嚴(yán)格按照BSL-2設(shè)計施工。

（3）排風(fēng)系統(tǒng)全部按照要求采用高效過濾器凈化。

（4）氣流組織：采用上送下排形式。

（5）壓力梯度控制通過微壓差計及精密自控系統(tǒng)控制。

（6）實驗室入口處顯示房間內(nèi)各項指標(biāo)參數(shù)，并設(shè)置偏離報警。

3、工藝設(shè)備

（1）實驗臺下部均留空，*。

（2）全部采用不銹鋼304制作。

（3）樣品制備區(qū)生物安全柜：BSC-||-B2型。

（4）樣品制備區(qū)設(shè)置洗眼裝置，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。

（5）非接觸式操作理念(感應(yīng)式水龍頭、感應(yīng)式自動門、互鎖傳遞窗等)。

五、設(shè)計依據(jù)

1、病毒肺炎應(yīng)急救治設(shè)施設(shè)計導(dǎo)則(衛(wèi)健委發(fā)布)

2、病毒實驗室生物安全指南(第二版，衛(wèi)健委發(fā)布)

3、實驗室生物安全手冊(WHO第三版)

4、生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范(GB 50346-2011)

5、實驗室生物安全通用要求( GB19489-2008 )

6、科研建筑設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)（JGJ91-2019）

7、醫(yī)院負(fù)壓隔離病房環(huán)境控制要求(GBT 35428-2017 )

8、病原微生物實驗室生物安全通用準(zhǔn)則WS 233―2017

9.臨床實驗室生物安全指南WST 442-2014