上海士鋒生物科技有限公司

ELISA試劑盒,進(jìn)口,中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,生物試劑,培養(yǎng)基,中間體

化工儀器網(wǎng)收藏該商鋪

14

聯(lián)系電話

13122441390

 QQ交談      小標(biāo) 您所在位置:首頁 > 資料下載> 士鋒生物轉(zhuǎn)染DEAE-葡聚糖介導(dǎo)實(shí)驗(yàn)步驟
產(chǎn)品搜索

請(qǐng)輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字:

環(huán)境類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

藥品行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品

抗生素

試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)品

生物試劑

培養(yǎng)基

PCR相關(guān)產(chǎn)品

細(xì)胞相關(guān)試劑

Omega Biotek

金標(biāo)試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)菌株

抗體

檢測(cè)、檢驗(yàn)試劑

食品安全檢測(cè)試劑盒

聯(lián)系方式
地址:上海市寶山區(qū)錦樂路
郵編:200431
聯(lián)系人:王小姐
電話:021-56640936
傳真:021-33250231
手機(jī):13122441390 15900755943
留言:發(fā)送留言
個(gè)性化:www.shifengsj.com
網(wǎng)址:www.shfeng-edu.com
商鋪:http://true-witness.com/st236594/
資料下載

士鋒生物轉(zhuǎn)染DEAE-葡聚糖介導(dǎo)實(shí)驗(yàn)步驟

最近更新時(shí)間:2013-10-16

提 供 商:上海士鋒生物科技有限公司資料大小:13.6KB

文件類型:JPG 圖片下載次數(shù):65次

資料類型:瀏覽次數(shù):580次

詳細(xì)介紹:
文件下載    

士鋒生物轉(zhuǎn)染DEAE-葡聚糖介導(dǎo)實(shí)驗(yàn)步驟,通過內(nèi)吞噬作用而使DNA轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞核,此法只適合暫時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),轉(zhuǎn)染效率與DEAE-葡聚糖濃度以及細(xì)胞與DNA/DEAE-葡聚糖混合液接觸時(shí)間的長(zhǎng)短很有關(guān)系,可采用較高濃度的DEAE-葡聚糖(1g/L)作用較短時(shí)間(30分鐘-1.5小時(shí)),又可用較低濃度(250g/L)的DEAE-葡聚糖作用較長(zhǎng)時(shí)間(8小時(shí))。

方法如下:

1. 接種鼠L成纖維細(xì)胞濃度為5×105CO2 /孔/皿生長(zhǎng)2~3天,當(dāng)達(dá)50%板底面積可用。

2. 乙醇沉淀的4μg的PSV2-neo質(zhì)粒dna,空氣干燥后溶于40μL的TE中,或取供體DNA。

3. 用10ml 1×PBS、4mL、10%富合生長(zhǎng)因子血清的DMEM洗板(皿)。

4. 在80μl熱的10g/L DEAE-葡聚糖中緩慢加入DNA,取120μL DNA/DEAE-葡聚糖加到每孔(皿)細(xì)胞中,使其分布均勻輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)直到顯示均勻一致的紅色,培養(yǎng)4小時(shí)。

5. 從孔(皿)中吸出DNA/DEAE-葡聚糖,加入5mL 10%DMSD,室溫放置1分鐘,吸出DMSO,用5mL 1×PBS洗一次吸出,加入10mL培養(yǎng)液(10%血清的DMEM)。

6. 培養(yǎng)細(xì)胞,在適當(dāng)時(shí)間分析細(xì)胞,若含有抗藥基因,可用G418選擇培養(yǎng)液培養(yǎng)。
 

[ 打印 ] [ 返回頂部 ] [ 關(guān)閉

| 商鋪首頁 | 公司檔案 | 產(chǎn)品展示 | 供應(yīng)信息 | 公司動(dòng)態(tài) | 詢價(jià)留言 | 聯(lián)系我們 | 會(huì)員管理 |
化工儀器網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作,未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://true-witness.com, All rights reserved.
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機(jī)站