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如何進(jìn)行魚血量的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)
最近更新時(shí)間：2013-11-4
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大?。?/span>14.3KB
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魚血量的測(cè)定
【原理】根據(jù)間接稀釋原理測(cè)定魚體循環(huán)血量。將一定量的物質(zhì)注入靜脈內(nèi)，待該物質(zhì)與血液混合達(dá)到平衡時(shí)，該物質(zhì)的濃度與血液的量成反比，血量越多，該物質(zhì)的稀釋倍數(shù)就越大。試驗(yàn)中采用的定量物質(zhì)必須是無(wú)毒，不容易被排泄，也不會(huì)擴(kuò)散到體內(nèi)其它體液，本試驗(yàn)采為51Cr.
【器材】魚、液體閃爍測(cè)定儀、肝素、Na251CrO4、生理鹽水、離心管、注射器、50ml容量瓶、恒溫水浴槽、平底試管、微試管。
【步驟】
⒈51Cr標(biāo)記紅細(xì)胞。
⑴取魚血1ml放入離心管內(nèi)，用少量二素抗凝。
⑵加0.5mlNa251CrO4溶液（6ucl/ml0.
⑶在10~
⑷將標(biāo)記的血液離心（
⒉注射51Cr標(biāo)記的紅細(xì)胞
地吸取0 .5ml標(biāo)記紅細(xì)胞懸浮液，從魚的尾靜脈注入體內(nèi)，標(biāo)記的紅細(xì)胞在血液循環(huán)中大約經(jīng)過(guò)30分鐘就可以均勻地分布。
⒊標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備
吸取0 .5ml紅細(xì)胞懸浮液，移入50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋到刻度，充分均勻之后取3ml于平底試管中，加蓋以備測(cè)定放射性強(qiáng)度。
⒋注射51Cr標(biāo)記的紅細(xì)胞30分鐘以后，從魚的尾靜脈抽取1ml血樣，吸取0.5ml血樣移入平底試管，待測(cè)定放射性強(qiáng)度。同時(shí)用微試管取少量血樣測(cè)定血細(xì)胞比容。
⒌用液體閃爍測(cè)定儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)樣品和試驗(yàn)樣品的放射性強(qiáng)度，以CPM計(jì)，并減去本底。
【計(jì)算】
V為血液的紅細(xì)胞量（容積）
V=Q/C
Q為注射到魚體內(nèi)標(biāo)記紅細(xì)胞的51Cr量，C為51Cr標(biāo)記的紅細(xì)胞在血液循環(huán)中均勻分布后的濃度（CPM/ml）
Q=
V1為注射的毫升數(shù)，Cs為標(biāo)準(zhǔn)樣品的計(jì)數(shù)率，100為標(biāo)準(zhǔn)樣品的稀釋倍數(shù)。
C=
zui后根據(jù)紅細(xì)胞量和血細(xì)胞比容計(jì)算血量。
【注意事項(xiàng)】
標(biāo)記的紅細(xì)胞懸浮液在使用時(shí)必須搖勻。