會(huì)員.png)
QQ交談
您所在位置：產(chǎn)品搜索
請(qǐng)輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
聯(lián)系方式
地址：上海市寶山區(qū)錦樂路
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機(jī)：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個(gè)性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://true-witness.com/st236594/
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機(jī)：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個(gè)性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://true-witness.com/st236594/
資料下載
士鋒生物豬瘟單克隆抗體ELISA試劑盒制備過程和使用方法
最近更新時(shí)間：2013-11-15
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大?。?/span>14.3KB
文件類型：JPG 圖片下載次數(shù)：136次
資料類型：瀏覽次數(shù)：540次
詳細(xì)介紹：
（一）材料及試劑
1．豬瘟單抗純化抗原
2．兔抗豬IgG酶標(biāo)抗體
3．豬瘟陽性血清
4．豬瘟陰性血清
1～4均由的生物制品所購買。
5．elisa反應(yīng)板
6．包被液
碳酸鈉 1.50g
碳酸氫鈉 2.93g
H2O加至 1 000ml
pH值9.6
7．PBS液
氯化鈉 8.90g
磷酸二氫鉀 0.20g
無水磷酸氫二鈉 2.13g
加雙餾水 1 000ml
8．PBS－吐溫洗滌液
PBS液 1 000ml
犢牛血清 5ml
混合即可
9．底物溶液
⑴ 0.1Mol/L檸檬酸液
檸檬酸 21g
雙蒸餾水加至 1 000ml
⑵ 0.2Mol/L Na2HPO4液
Na2HPO4·12H2O 71.6g
雙蒸餾水 加至 1 000ml
⑶ pH5.0磷酸鹽－檸檬酸緩沖液
?、乓?24.30ml
⑵液 25.70ml
混勻即可
⑷鄰苯二胺液
取⑶液 50ml
雙餾水 50ml
磷苯二胺 20mg
30%H2O2 0.15ml
待鄰苯二胺溶化后再加H2O2，現(xiàn)用現(xiàn)配。
10．終止液
濃H2SO4（98%） 22.2ml
H2O 177.80ml
（二）操作方法
1．用包被液將豬瘟弱毒單抗純化酶聯(lián)抗原、豬瘟強(qiáng)毒單抗純化酶聯(lián)抗原各做100倍稀釋，每孔包被100µl，4℃濕盒。
2．次日取出，甩去孔內(nèi)液體，3×3′沖洗。
3．將待檢血清以PBS液做400倍稀釋，每孔加100µl同時(shí)將豬瘟陽性血清、豬瘟陰性血清各做100倍稀釋，于對(duì)照孔中加100μl。37℃溫育1.5h～2h。
4．重復(fù)第二步，取出，甩去孔內(nèi)液體，3×3′洗滌。
5．將兔抗豬IgG酶標(biāo)抗體以PBS液做100倍稀釋，每孔加100μl，37℃溫育1.5h～2h。
6．重復(fù)第4步。
7．每孔加底物溶液100µl，室溫下觀察顯色反應(yīng)。當(dāng)陰性對(duì)照孔稍顯色時(shí)，立即終止反應(yīng)，并以陰性孔做空白對(duì)照。
8．每孔加終止液50µl立即于酶聯(lián)免疫吸附檢測儀測定490nm波長的光密度。
（三）結(jié)果判定
在豬瘟弱毒酶聯(lián)板上，OD≥0.2，為豬瘟弱毒抗體陽性；OD＜0.2，為豬瘟弱毒抗體陰性。
在豬瘟強(qiáng)毒酶聯(lián)板上，OD≥0.5，為豬瘟強(qiáng)毒抗體陽性；OD＜0.2，為豬瘟強(qiáng)毒抗體陰性。