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士鋒生物粗糙鏈孢霉的雜交
最近更新時(shí)間:2013-12-24
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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?nbsp;
通過(guò)對(duì)鏈孢霉雜交所產(chǎn)生的子囊孢子的觀察,了解分離和交換現(xiàn)象,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)算交換值。
二、材料及生活史
1.材料:粗糙鏈孢霉(Neurospore crassa )屬于真菌類,子囊菌綱,球殼目,脈孢菌屬,又稱為紅色面包霉。
2.生活史:粗糙面包霉的營(yíng)養(yǎng)體是由單倍性(n=7)的多核菌絲組成的。生殖方式有無(wú)性生殖和有性生殖兩種。無(wú)性生殖是菌絲片段或分生孢子經(jīng)有絲分裂直接發(fā)育成菌絲體。有性生殖是不同接合型的菌絲產(chǎn)生有性孢子的過(guò)程,主要有兩種方式:(1)未受精的營(yíng)養(yǎng)體菌絲上產(chǎn)生灰白色的原子囊果,可以接受另一不同接合型的分生孢子,通過(guò)雜交形成合子。(2)不同接合型的菌絲靠在一起,通過(guò)核融合產(chǎn)生異核體。兩種有性生殖方式形成的二倍性合子都可以經(jīng)減數(shù)分裂形成四個(gè)子細(xì)胞,每個(gè)子細(xì)胞又經(jīng)一次有絲分裂形成8個(gè)子細(xì)胞,進(jìn)一步發(fā)育形成8個(gè)子囊孢子,并以一定順序排列在子囊中,許多子囊又被包在黑色的子囊果中。若兩個(gè)親代菌株有某一遺傳性狀的差異,那么經(jīng)雜交所形成的子囊必定有四個(gè)子囊孢子屬于一種類型,其它四個(gè)子囊孢子屬于另一類型。成熟的子囊孢子在適當(dāng)條件下可發(fā)育成菌絲,形成新的一代。它們的子囊孢子的性狀的分離比例是嚴(yán)格的1:1,而且有一定的順序。不同接合型的子囊孢子具有黑色、白色兩種類型,在子囊中8個(gè)子囊孢子常呈4黑4白的排列方式,因此可在顯微鏡下直接觀察基因的分離現(xiàn)象。當(dāng)基因發(fā)生了互換時(shí),8個(gè)子囊孢子又會(huì)排列成2黑2白2黑2白或排列成2黑4白2黑或2白4黑2白,因此在顯微鏡下也可以觀察基因的連鎖互換現(xiàn)象。
三、材料的優(yōu)點(diǎn)
1.野生型的子囊孢子成熟較早,在一定時(shí)期呈現(xiàn)黑色,賴氨酸缺陷型的子囊孢子成熟較晚,在一定時(shí)期呈現(xiàn)灰白色。以上兩種接合型的粗糙鏈孢霉雜交在適當(dāng)時(shí)期可以觀察到六種子囊類型。
2.子囊孢子排列的順序固定,可直接觀察到基因的交換。
3.可以計(jì)算基因與著絲粒的距離。
4.如果出現(xiàn)A6、a2、A5、a3則表示基因轉(zhuǎn)變。