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士鋒生物植物組織中自由水和束縛水含量的測(cè)定
最近更新時(shí)間：2014-3-5
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大小：50.6KB
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植物組織中的水分以自由水和束縛水兩種不同的狀態(tài)存在。自由水與束縛水含量的高低與植物的生長(zhǎng)及抗性有密切關(guān)系。自由水／束縛水比值高時(shí)，植物組織或器官的代謝活動(dòng)旺盛，生長(zhǎng)也較快，抗逆性較弱；反之，則生長(zhǎng)較緩慢，但抗性較強(qiáng)。因此，自由水和束縛水的相對(duì)含量可以作為植物組織代謝活動(dòng)及抗逆性強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。
一、原理:
自由水未被細(xì)胞原生質(zhì)膠體顆粒吸附而可以自由移動(dòng)、蒸發(fā)和結(jié)冰，也可以作為溶劑。束縛水則被細(xì)胞原生質(zhì)膠體顆粒吸附而不易移動(dòng)，因而不易被奪取，也不能作為溶劑?；谏鲜鎏攸c(diǎn)以及水分依據(jù)水勢(shì)差而移動(dòng)的原理，將植物組織浸入高濃度（低水勢(shì)）的糖溶液中一定時(shí)間后，自由水可全部擴(kuò)散到糖液中，組織中便留下束縛水。自由水?dāng)U散到糖液后（相當(dāng)于增加了溶液中溶劑）便增加了糖液的重量，同時(shí)降低了糖液的濃度。測(cè)定此降低了的糖液的濃度，再根據(jù)原先已知的高濃度糖液的濃度及重量，可求出濃度降低了的糖液的重量。用濃度降低了的糖液的重量減去原來高濃度糖液的重量即為植物組織中的自由水的量（即擴(kuò)散到高濃度糖液中的水的量）。zui后，用同樣的植物組織的總含水量減去此自由水的含量即是植物組織中束縛水的含量。
二、材料、儀器設(shè)備及試劑
（一）材料：小白菜、棉花葉片。
（二）儀器設(shè)備：1.阿貝折射儀；2.分析天平或電子頂載天平（感量0.1mg）；3.烘箱；4.干燥器；5.稱量瓶；6.打孔器（面積0.5cm2左右）；7.燒杯；8.瓷盤；9.托盤天平（1/100g）；10.量筒。
（三）試劑：重量百分濃度為60％～65％的蔗糖溶液：用托盤天平稱取蔗糖60～65g，置燒杯中，加蒸餾水40～35g，使溶液總重量為100g，溶解后備用。
三、實(shí)驗(yàn)步驟
1.植物組織中總含水量的測(cè)定
（1）取稱量瓶3只（三次重復(fù)，下同），依次編號(hào)并分別準(zhǔn)確稱重。（2）在田間選取生長(zhǎng)一致的待測(cè)的植物數(shù)株，各選部位、長(zhǎng)勢(shì)、葉齡一致的有代表性葉子數(shù)片。用打孔器鉆取小圓片150片（注意避開粗大的葉脈），立即裝到上述稱量瓶中（每瓶隨機(jī)裝入50片），蓋緊瓶蓋并稱重。（3）將稱量瓶連同小圓片置烘箱中105℃下烘15min以殺死植物組織細(xì)胞，再于80～90℃下烘至恒重（稱重時(shí)須置干燥器中，待冷卻后稱）。設(shè)稱量瓶重量為W1，稱量瓶與小圓片的重量為W2，稱量瓶與烘干的小圓片的重量為W3（以上重量單位均設(shè)為g，下同）。則植物組織的總含水量（％）可按下式計(jì)算
植物組織的總含水量（％）＝（W2－W3）/（W2－W1）×100
根據(jù)上式可分別求出三次重復(fù)所得到的組織總含水量的值并進(jìn)一步求出其平均值。
2.植物組織中自由水含量的測(cè)定（1）另取稱量瓶3只，編號(hào)并分別準(zhǔn)確稱重。（2）用打孔器打取小葉圓片150片（植物材料的選取同上），立即隨機(jī)裝入三個(gè)稱量瓶中（每瓶裝50片），蓋緊瓶蓋并立即稱重。（3）三個(gè)稱量瓶中各加入60％～65％的蔗糖溶液5ml左右，再分別準(zhǔn)確稱重。（4）各瓶于暗處置4～6h（經(jīng)減壓處理后，只需在暗處置1h），其間不時(shí)輕輕搖動(dòng)。到預(yù)定的時(shí)間后，充分搖動(dòng)溶液。用阿貝折射儀（見附注）分別測(cè)定各瓶糖液濃度，同時(shí)測(cè)定原來的糖液濃度。設(shè)稱量瓶重量為W1，稱量瓶與小圓片的重量為W2，稱量瓶與小圓片及糖液的重量為W4，糖液原來的濃度為C1，浸過植物組織后的糖液的濃度為C2。則植物組織中自由水的含量（％）可由下式算出：
植物組織中自由水的含量（％）＝（W4－W2）×（C1－C2）/