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士鋒生物植物的組織培養(yǎng)技術(shù)
最近更新時(shí)間：2014-3-21
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植物組織培養(yǎng)理論依據(jù)是植物細(xì)胞具有性。
植物組織培養(yǎng)是指用無(wú)菌培養(yǎng)的方法，在人工制備的培養(yǎng)基上培養(yǎng)植物體的一個(gè)離體器官、離體的一種組織，或單個(gè)細(xì)胞，這些離體的器官組織，或單個(gè)細(xì)胞在無(wú)菌條件下不斷生長(zhǎng)，并經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)移，能夠一代一代的延續(xù)生長(zhǎng)下去，它的方法與微生動(dòng)物培養(yǎng)技術(shù)相似，全部在人工控制下進(jìn)行。
組織培養(yǎng)技術(shù)內(nèi)容是20年來(lái)已經(jīng)從組織培養(yǎng)（組織塊培養(yǎng)）發(fā)展到細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞融合培養(yǎng)等等。并用之進(jìn)行各種生理化及遺傳操作研究。
三、實(shí)驗(yàn)劑試劑和設(shè)備
1．試劑一MS培養(yǎng)基需要量mg/L
NH4NO3 1650mg
KNO3 190mg
KH2PO4 170mg
MgSO4.2H2O 370mg
CaCl2.2H2O 440mg
FeSO4.7H2O 2.79mg
MnSO4.7H2O 8.6mg
H3BO3 6.3mg
KI 0.83mg
NaMoO4.2H2O 0.25mg
CuSO4.5H2O 0.025mg
COCl2.6H2O 0.025mg
甘氨酸 0.2mg
VB1 0.4mg
VB6 0.5mg
植物的組織培養(yǎng)技術(shù)
為了配制培養(yǎng)基方便，通常配制一系列的母液。大量元素可單獨(dú)或混合配制成使用濃度的10倍，微量元素可混合配制成使用濃度的1000倍，維生素生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)單獨(dú)配制成使用濃度的1000倍，鐵液也單獨(dú)配成母液，常用的是EDTA螯和鐵。
2．MS培養(yǎng)基母液的配制
（1）大量元素母液（10倍）配1000ml
NH4NO3 16.5g
KNO3 19g
KH2PO4 1.7g
MgSO4.2H2O 3.7g
CaCl2.2H2O 4.4
CaCl2.2H2O吸濕性強(qiáng)，稱(chēng)取隨時(shí)蓋蓋子。以上分別溶解，順序混合，因Ca易產(chǎn)生沉淀所以zui后加入，可加熱助溶，定容至1000ml。
（2）微元素母液（1000倍）
KI 415mg
NaMoO4.2H2O 125mg
CuSo4.5H2O 12.5mg
CoCl2.6H2O 12.5mg
MnSO4.7H2O 11.15mg
ZnSO4.7H2O 4.3g
H3BO3 3.1g
zui后定容至500ml