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士鋒生物磷硫鐵法測(cè)定血清膽固醇
最近更新時(shí)間：2014-5-22
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大小：50.6KB
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質(zhì)，其呈色度與膽固醇含量成正比，可于550nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色測(cè)定。正常血清中膽固醇的含量有隨年齡增大而增加的趨勢(shì)，其平均正常值在l10～220mg/100mL。
三、儀器和試劑
儀器
722分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、具塞錐形瓶等。
試劑
1．1.0mg/mL膽固醇貯存液：將100.0mg膽固醇溶于100mL無(wú)水甲醇中。
2.0.02mg/mL膽固醇工作掖：取2mL膽固醇貯存液加98mL無(wú)水甲醇。
3.三氯化鐵溶液：5.0gFeCl3·6H2O溶于200mL濃磷酸中。
4.磷硫鐵試劑(P-S-Fe試劑)：取40mL的三氯化鐵溶液用濃硫酸定容到500mL。
四、操作步驟
1.取兩支帶帽試管，各加入0.1mL血清和10mL無(wú)水甲醇，立即用力振蕩(或Vortexmixer上混10s)。
2.將兩支試管于臺(tái)式離心機(jī)上高速(3000rpnI)離心5min。各取2.0mL上清液轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的錐形瓶
中。
3.取0.02mg/mL膽固醇工作液2.0mL轉(zhuǎn)移到第三個(gè)錐形瓶中，用作標(biāo)準(zhǔn)。
4.取2.0mL甲醇加入到第四個(gè)錐形瓶中，用做空白。
5.向4個(gè)錐形瓶中緩慢加入2.0mL的磷硫鐵試劑，輕輕振蕩均勻。
6.封住錐形瓶口，置室溫30min，所生顏色在1h內(nèi)穩(wěn)定。
7.將上述各錐瓶中的有色溶液于550nm下進(jìn)行比色測(cè)定，作記錄。.