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昆蟲細胞的培養(yǎng)液適應(yīng)[4階段]
最近更新時間：2014-8-21
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*階段：1．準備合適體積的由25%體積新培養(yǎng)液和75%舊培養(yǎng)液（即細胞原先適應(yīng)的培養(yǎng)液）組成的混合培養(yǎng)液I。2．將細胞以通常分裝時使用的zui低分裝密度的兩倍分裝到混合培養(yǎng)液I中。3．使細胞生長到通常培養(yǎng)時的較高密度，監(jiān)測細胞生長參數(shù)。4．繼續(xù)以步驟2中的密度分裝細胞到新鮮的混合培養(yǎng)液I中，直到生長參數(shù)達到可以接受的水平。有時候分裝一次就可達到要求。5．一旦細胞穩(wěn)定下來，以通常使用的zui低分裝密度分裝細胞至新鮮的混合培養(yǎng)液I中，同樣監(jiān)測細胞參數(shù)。6．細胞達到較高密度后，繼續(xù)以步驟5中的分裝密度把細胞分裝到新鮮的混合培養(yǎng)液I中，直到細胞的生長參數(shù)達到可以接受的水平。7．如果細胞恢復(fù)到正常狀態(tài)，進行第二階段的實驗。8．如果細胞不能達到正常狀態(tài)，新培養(yǎng)液可能不適于培養(yǎng)這種細胞。9．如果細胞在新培養(yǎng)液中的生長參數(shù)達到平衡狀態(tài)，雖然與正常狀態(tài)不同，但是可以為實驗接受，也可進行第二階段的實驗。第二階段：1．準備適量的由50%新培養(yǎng)液和50%舊培養(yǎng)液組成的混合培養(yǎng)液II。2．將細胞以兩倍zui低分裝密度分裝至混合培養(yǎng)液II中。3．如*階段一樣，監(jiān)測細胞生長指數(shù)，使細胞達到穩(wěn)定狀態(tài)。然后將分裝密度降到zui低分裝密度，再使細胞達到穩(wěn)定狀態(tài)。第三階段：步驟同*階段和第二階段，使細胞適應(yīng)混合培養(yǎng)液III（75%新培養(yǎng)液和25%舊培養(yǎng)液）。第四階段：1．步驟同*階段、第二階段和第三階段，使細胞適應(yīng)新培養(yǎng)液。2．當細胞在新培養(yǎng)液中達到穩(wěn)定后，監(jiān)測細胞的生長指數(shù)，看是否波動過大。