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體細(xì)胞Barr小體觀察
最近更新時(shí)間：2014-9-11
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在XY型性決定的生物個(gè)體中，雌性個(gè)體的細(xì)胞中有兩條X染色體，而雄性個(gè)體的細(xì)胞中僅有一條X染色體。由于兩種個(gè)體在X染色體的數(shù)量上是不相等的，因而雌、雄個(gè)體X染色體上的基因產(chǎn)物也可能是不相等的。針對(duì)這一現(xiàn)象，Muller于1932年提出劑量補(bǔ)償效應(yīng)，說明可以使具有兩份基因的個(gè)體和具有一份基因的個(gè)體表現(xiàn)出相同表型的一種遺傳機(jī)制的觀點(diǎn)。1949年，M．L．Barr等人發(fā)現(xiàn)，在貓的雌性個(gè)體內(nèi)，神經(jīng)細(xì)胞核膜內(nèi)緣有一染色很深的小體(后來定名為x小體或Barr氏小體)，而雄性個(gè)體細(xì)胞中則沒有。以后在人類女性口腔上皮細(xì)胞中，也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)構(gòu)。經(jīng)研究認(rèn)為這是失活的異固縮狀態(tài)的x染色質(zhì)，并發(fā)現(xiàn)它屬于延遲復(fù)制的染色體。X小體的數(shù)目在正常女性中是X染色體數(shù)目減去一。經(jīng)觀察，X小體一般1-1.5微米，呈三角形或卵圓形。
20世紀(jì)60年代以來，不少學(xué)者曾提出了一些假說來解釋這一現(xiàn)象。其中比較的假說是由M．F．Lyon于1961年提出的Lyon假說（Lyon hypothesis）：
1.正常雌性哺乳動(dòng)物的體細(xì)胞中，兩條X染色體中只有一條在遺傳上有活性，另一條在遺傳上無活性。
2.X染色體的失活是隨機(jī)的。
3.失活發(fā)生在胚胎發(fā)育早期，X染色體一經(jīng)失活，其后代細(xì)胞中該染色體均處于失活狀態(tài)。
4.雜合體雌性在伴性基因的作用上是嵌合體。
一些學(xué)者以另一些事實(shí)來反對(duì)Lyon的假說。
因?yàn)閄染色體的失活是個(gè)比較復(fù)雜的生物學(xué)問題，目前對(duì)這一現(xiàn)象仍然存在著一些難以解釋的疑點(diǎn)。例如，是否所有組織的全部細(xì)胞中，在任何時(shí)間都存在這種X小體，失活的X小體是如何進(jìn)行復(fù)制的?等等。
雖然對(duì)X小體存在著一些不同看法，但目前X染色質(zhì)的檢查，在醫(yī)學(xué)遺傳的研究中，臨床和法醫(yī)診斷上仍具有一定的意義。
三 實(shí)驗(yàn)材料
人體口腔上皮細(xì)胞或毛囊細(xì)胞
四 實(shí)驗(yàn)器具和藥品
實(shí)驗(yàn)器具：顯微鏡、載 片、蓋片、無 菌牙簽等。
實(shí)驗(yàn)藥品：
(1)1N或5N鹽酸或濃鹽酸和95％乙醇 1：1的混合液
(2)改良苯酚品紅染色液
五 實(shí)驗(yàn)過程
1．口腔粘膜細(xì)胞Barr氏小體顯示方法
（1）取材與固定 實(shí)驗(yàn)前用可食用水漱口，然后以無菌牙簽刮取口腔頰部粘膜(*次的刮取物棄去)，將刮取物均勻涂于載玻片上，放在空氣中干燥?；蛞跃凭珶敉庋婵靖?，注意材料不可過熱加溫。
（2）染色與觀察：用改良苯酚品紅染液染色10－15分鐘，傾斜載玻片，倒掉染液。用吸水紙輕輕擦拭干載玻片上的染液。放于顯微鏡下觀察。
注意事項(xiàng)：
在制作的玻片標(biāo)本中，選擇細(xì)胞輪廓清楚、染色清晰，核大，核質(zhì)呈均勻細(xì)網(wǎng)狀的細(xì)胞100個(gè)，統(tǒng)計(jì)巴氏小體的頻率(可與男性細(xì)胞對(duì)照觀察)。