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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)

最近更新時(shí)間:2014-10-8

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詳細(xì)介紹:

*節(jié)顯微技術(shù)

光學(xué)顯微鏡:以可見(jiàn)光(或紫外線)為光源。

電子顯微鏡:以電子束為光源。

一、光學(xué)顯微鏡

(一)普通光學(xué)顯微鏡

1、構(gòu)成:

①照明系統(tǒng)

②光學(xué)放大系統(tǒng)

③機(jī)械裝置

2、原理:經(jīng)物鏡形成倒立實(shí)像,經(jīng)目鏡進(jìn)一步放大成像。

3、分辨力:指分辨物體zui小間隔的能力。

R=0.61λ/N.A.

其中λ為入射光線波長(zhǎng);N.A.為鏡口率=nsinα/2,n=介質(zhì)折射率;α=鏡口角(樣品對(duì)物鏡鏡口的張角) 。

思考:如何提高顯微鏡的分辨能力?

表一、幾種介質(zhì)的折射率

介質(zhì)    空氣   水   香柏油   α溴萘

折射率   1    1.33   1.515    1.66

顯微鏡的幾個(gè)光學(xué)特點(diǎn):

制作光學(xué)鏡頭所用的玻璃折射率為1.65~1.78,所用介質(zhì)的折射率越接近玻璃的越好。

sin α /2的zui大值必然小于1;介質(zhì)為空氣,鏡口率一般為0.05~0.95;油鏡頭用香柏油為介質(zhì),鏡口率可接近1.5。

普通光線的波長(zhǎng)為400~700nm,分辨力數(shù)值不會(huì)小于0.2μm,人眼的分辨力為0.2mm,因此顯微鏡的zui大設(shè)計(jì)倍數(shù)為1000X。

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