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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
最近更新時(shí)間:2014-10-8
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*節(jié)顯微技術(shù)
光學(xué)顯微鏡:以可見(jiàn)光(或紫外線)為光源。
電子顯微鏡:以電子束為光源。
一、光學(xué)顯微鏡
(一)普通光學(xué)顯微鏡
1、構(gòu)成:
①照明系統(tǒng)
②光學(xué)放大系統(tǒng)
③機(jī)械裝置
2、原理:經(jīng)物鏡形成倒立實(shí)像,經(jīng)目鏡進(jìn)一步放大成像。
3、分辨力:指分辨物體zui小間隔的能力。
R=0.61λ/N.A.
其中λ為入射光線波長(zhǎng);N.A.為鏡口率=nsinα/2,n=介質(zhì)折射率;α=鏡口角(樣品對(duì)物鏡鏡口的張角) 。
思考:如何提高顯微鏡的分辨能力?
表一、幾種介質(zhì)的折射率
介質(zhì) 空氣 水 香柏油 α溴萘
折射率 1 1.33 1.515 1.66
顯微鏡的幾個(gè)光學(xué)特點(diǎn):
制作光學(xué)鏡頭所用的玻璃折射率為1.65~1.78,所用介質(zhì)的折射率越接近玻璃的越好。
sin α /2的zui大值必然小于1;介質(zhì)為空氣,鏡口率一般為0.05~0.95;油鏡頭用香柏油為介質(zhì),鏡口率可接近1.5。
普通光線的波長(zhǎng)為400~700nm,分辨力數(shù)值不會(huì)小于0.2μm,人眼的分辨力為0.2mm,因此顯微鏡的zui大設(shè)計(jì)倍數(shù)為1000X。