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快速、靈敏安全的考馬斯蛋白染色
最近更新時(shí)間：2015-3-27
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快速方便的染色步驟
SimplyBlue? SafeStain的實(shí)驗(yàn)步驟易于操作，在不到3個(gè)小時(shí)的時(shí)間內(nèi)就能完成，條帶在染色液中馬上可以顯現(xiàn)，不需要脫色，但是為了達(dá)到*靈敏度，可以使用基于水的脫色步驟。
靈敏的染色結(jié)果
SimplyBlue? SafeStain融合了*的膠體狀考馬斯G－250染色液和一種優(yōu)化的染色步驟，達(dá)到納克級(jí)的靈敏度，1微克蛋白在染液中5分鐘就可以檢測(cè)到，使用額外的基于水的脫色可以檢測(cè)到7ng蛋白（還原型BSA）（圖1 ）。
圖1 使用SimplyBlue? SafeStain靈敏的染色結(jié)果
下列樣品在Nupage? Novex 4-12% Bis－Tris gel上分離，然后使用SimplyBlue? SafeStain染色。
Lane1 : 6 μg protein mix
Lane 2: 1 μg rabbit IgG
Lane 3: 1 μg reduced BSA
Lane 4: 5 μg E.coli lysate
Lane 5: 20 ng reduced BSA
Lane 6: 10 ng reduced BSA
Lane 7: 7 ng reduced BSA
Lane 8: 3 ng reduced BSA
Lane 9: 10 μg Mark12? Satndard
Lane 10: 5 μg Mark12? Standard
安全無害的染色液
不象傳統(tǒng)的R－250和部分G－250染液，SimplyBlue? SafeStain不需要甲醇或醋酸固定/脫色，避免了暴露在有毒物質(zhì)和異味中的危險(xiǎn)，創(chuàng)造了一個(gè)更安全的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。因?yàn)槭褂肧implyBlue? SafeStain不需要有害物質(zhì)的相關(guān)花費(fèi)，你節(jié)省了有毒物品的運(yùn)輸、儲(chǔ)存和處理費(fèi)用，獨(dú)立測(cè)試確認(rèn)SimplyBlue? SafeStain無毒、無害、不易燃燒且無腐蝕性。在大多數(shù)地區(qū)，SimplyBlue? SafeStain可以直接倒入下水道。
質(zhì)譜兼容的染液
使用SimplyBlue? SafeStain染色的蛋白和質(zhì)譜分析兼容，所以你將得到目的蛋白*覆蓋度（圖2 ,3 和表1 ）。
圖2 菠菜染色質(zhì)提取物的雙向電泳（2DE）實(shí)驗(yàn)；用SimplyBlue? SafeStain染色
用ZOOM? IEF Fractionator對(duì)菠菜染色質(zhì)提取物進(jìn)行預(yù)分離，不同的組分進(jìn)行2D分離，使用一定pH區(qū)間的ZOOM?膠條和NuPAGE 4－12%Bis－Tris ZOOM?膠。然后用SimplyBlue? Safestain進(jìn)行染色。
圖3 用SimplyBlue? SafeStain染色的菠菜染色質(zhì)MALD1圖譜
ATP合成酶CF1 β-鏈的MALDI指紋
表1 用SimplyBlue? SafeStain染色后的光譜分析結(jié)果
| 點(diǎn) | 蛋白質(zhì) | ％覆蓋度 | Z-值 |
| 1 | 光合體系II的放氧復(fù)合體蛋白1（菠菜） | 70 | 2.43 |
| 2 | ATP合成酶CF1 β-鏈(菠菜) | 80 | 2.43 |
| 3 | 二磷酸核酮糖羧化酶激酶（菠菜） | 63 | 2.43 |