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低背景的蛋白質(zhì)銀染方法
最近更新時(shí)間：2015-4-27
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大?。?/span>50.6KB
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我們做蛋白質(zhì)電泳的人都知道，銀染色很靈敏，有很強(qiáng)的說(shuō)服力，但通常膠背景較深，不易掃描。在這里介紹一下低背景的蛋白質(zhì)銀染方法。
Step Reagent Time/min
Fix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60
Rinse 50% EtOH 5 min, 3 times
Sensitive 0.02% Na2S2O3 1 min
Rinse Double distilled H2O 1 min, 3 times
Silver 0.5% AgNO3, 0.075% HCHO(現(xiàn)用現(xiàn)加) 20 min
Wash* Double distilled H2O 1 min, 2 times
Develop 6% Na2CO3, 0.0004% Na2S2O3, 0.05% HCHO 4-15 min
Stop 50% EtOH, 12% HAC
*說(shuō)明，此步中洗滌過(guò)程要控制好，時(shí)間太長(zhǎng)，可能顯色時(shí)間太長(zhǎng)甚至染不出色；反之，時(shí)間太短，銀沒有洗干凈，背景變深。但做幾次以后就很快掌握了。