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雙向電泳蛋白點的切取和保存
最近更新時間：2015-6-1
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大小：50.6KB
文件類型：PNG 圖片下載次數：257次
資料類型：未知文件瀏覽次數：871次
1. 用 PDQuest軟件或肉眼比對，找出感興趣的蛋白點，并做好標記和記錄。
2. 用 MilliQ水沖洗膠 2 次。
3. 用色譜純甲醇和 MilliQ水沖洗 Ep 管
4. 將槍頭(200μl)下端剪去，使其內徑略小于蛋白斑點的直徑，用色譜純甲醇和MilliQ水沖洗槍頭。
5. 對準斑點中央小心將蛋白切割下來，放入Ep 管，MilliQ水漂洗 2 次，如膠塊 太大，將其切成 1 x 1 mm 的膠片。
6. 將切好的點做好標記和記錄，置- 80℃ 保存或凍干后- 20℃ 存放。
注意事項：
1. 盡量避免皮膚和頭發(fā)的角蛋白的污染，在操作過程中應戴一次性的 PE 手套 （不用乳膠手套）和帽子。
2. 不要將膠長期存放于乙酸溶液中。
3. Ep 管及染膠的容器必須用甲醇和水充分清洗，尤其應與進行Western blotting 的容器分開，以避免 casein 或 BSA 的污染。