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核磁共振的原理
最近更新時(shí)間:2017-9-20
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簡(jiǎn)單的說(shuō)就是,處于一個(gè)靜磁場(chǎng)中的核子(質(zhì)子和中子),會(huì)由于磁場(chǎng)的作用而處于不同的能量狀態(tài),當(dāng)一個(gè)外界的擺動(dòng)的磁場(chǎng)來(lái)擾動(dòng)處于“平衡”狀態(tài)的核子時(shí),吸收了能量的核子就會(huì)從不同的能級(jí)之間要遷,并再此過(guò)程中會(huì)釋放出能量。而放出的能量被檢測(cè)到之后,經(jīng)過(guò)分析和計(jì)算就可以得到蛋白質(zhì)內(nèi)部的原子的結(jié)構(gòu)信息。
進(jìn)一步解釋一下:首先不是所有的原子都是有NMR現(xiàn)象的,也不是具有了NMR現(xiàn)象就可以用于蛋白結(jié)構(gòu)解析。象O16,C12是沒(méi)有核磁共振現(xiàn)象的(偶數(shù)的質(zhì)子中子和偶數(shù)的電子),象H2,N14,NMR很難分析也很少研究。只有C13,N15,H1才真正的被用于研究,并用于結(jié)構(gòu)解析。所以小一點(diǎn)的蛋白(小于10kd)因?yàn)楹凶銐虻腍,可以直接用來(lái)NMR分析,而更大的蛋白則需要同位素標(biāo)記,就是在M9培養(yǎng)中,加入C13的葡萄糖,N15的NH4cl,然后誘導(dǎo),從而是表達(dá)出來(lái)的蛋白中的原子都是具有NMR的C13,N15,H1。
NMR所用到的靜磁場(chǎng),是磁場(chǎng)非常強(qiáng)大的靜磁場(chǎng)。例如750MHz的譜儀,它的靜磁場(chǎng)是17.5T(特斯拉),這么強(qiáng)的磁場(chǎng)是通過(guò)電磁場(chǎng)產(chǎn)生的,我們知道螺旋線圈是可以產(chǎn)生磁場(chǎng)的,NMR所用的就是處于超導(dǎo)狀態(tài)下的螺旋線圈中的電流產(chǎn)生的磁場(chǎng),為了是線圈是超導(dǎo),所用要將線圈放在液氦中,使溫度接近零度。所以NMR要消耗大量的液氦,還有液氮(放在液氦外面)。
所以NMR是很昂貴的試驗(yàn),*是樣品需要同位素標(biāo)記,第二是儀器非常貴重。