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實驗技巧:聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)
最近更新時間:2013-4-10
提 供 商:上海士鋒生物科技有限公司資料大小:214.3KB
文件類型:JPG 圖片下載次數(shù):125次
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改進一:配膠
背景:在配制SDS-PAGE膠的時候,加入分離膠的過程中常常會帶入氣泡,即使用雙蒸水來壓平界面也有可能因為力度不勻而導(dǎo)致膠面不夠齊平,zui后使跑出來的相同大小的蛋白條帶不在同一個水平面上。
方法改進:所做的改進很簡單卻很有效,加完分離膠后,用移液槍吸取酒精(濃度沒有特別要求,干凈無污染就好)加到分離膠上至覆蓋界面,靜置片刻后放到37℃恒溫箱中可加速膠的凝固。待到分離膠*凝固之后倒去上層的酒精,就可以看到齊平漂亮的界面啦!
改進二:脫色
背景:給染色結(jié)束的SDS-PAGE膠脫色往往需要比較長的時間,否則會由于脫色不*而導(dǎo)致條帶不清晰,影響到拍照的效果。
方法改進:改進的方法很簡單易行——取一張我們常常隨身攜帶的面巾紙,打個結(jié)放入盛有脫色液的大培養(yǎng)皿里放到脫色搖床上,這樣一來,原來過夜脫色達到的效果現(xiàn)在只需要短短的3、4個小時就可以輕松實現(xiàn)了。
PS:希望大家這個時候用的面巾紙是質(zhì)量比較好不容易掉屑的...
改進三:如何方便地取出SDS-PAGE膠?
背景:在跑完SDS-PAGE后,取膠通常是一個問題,由于膠和玻璃貼的比較緊,一不小心就可能把玻璃板弄壞。將膠從玻板上取下的時候膠也很容易碎掉。
方法改進:用流水沖玻璃板的縫隙處(也就是凝膠部分),一邊沖一邊輕輕掀起玻板,用水去充滿玻板和膠之間的縫隙,很容易能把玻板掀開。接下來把玻板反過來,讓膠面朝下,使其一端浸入到一個盛著水的大平皿中,輕輕晃動,膠很快就會被水帶到平皿中了,絲毫不會損傷膠。
這個方法非常簡單,下次你也可以試試哦。