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上海士鋒生物新技術在研究細胞分裂中的蛋白分離中的應用
點擊次數(shù)：776 發(fā)布時間：2013-8-12
染色體分離是細胞分裂過程中的關鍵步驟，近期一個由奧地利、德國等組成的科研小組運用RNAi技術、蛋白定位等技術對近百種之前未被全面認識的人類蛋白復合物進行了全面的分析，相關研究成果發(fā)表在Science雜志上。
近年來，利用酵母等真核模式生物突變體，研究人員克隆了一些調(diào)控細胞分裂早期姊妹染色體黏著和后期黏著素酶解的關鍵基因，初步闡明了染色體分離的分子調(diào)控機理.由多亞基蛋白組成的黏著素是保證染色體正確黏著和分離的關鍵分子。在細胞分裂中后期過渡時，經(jīng)過一系列的分子識別和互作導致黏著素蛋白選擇性地降解，使染色體分離。
染色體分離與細胞分裂是關系生命體生存的關鍵生命活動過程，在這2個過程中有大量的蛋白復合物參與調(diào)控。
近期，多國研究人員組成的聯(lián)合研究小組應用RNAi技術對大量參與其中的蛋白質(zhì)復合物進行掃描分析，整個過程鑒定了許多與染色體分離、細胞分裂相關的蛋白復合物，但是，關于這些蛋白復合物的功能研究卻十分罕見。
為了探明這些蛋白復合物，科學家們應用基因標簽技術，蛋白定位技術、MitoCheck等技術分析100種人類蛋白復合物，這100種蛋白復合物大部分的還沒有被全面的了解。這項新的研究工作將在前人的基礎上，對這100個蛋白復合物進行全面的分析。
這種高通量的分析有助人們了解蛋白復合物的亞基、復合體等多個結(jié)構(gòu)的生理功能。
這項研究大大加深了人們對于細胞分裂過程中染色體和蛋白分離的認識，對于進一步了解相關蛋白復合物的功能提供了重要參考，也側(cè)面說明了RNAi技術在科研工作中的廣闊應用前景。
Systematic Analysis of Human Protein Complexes Identifies Chromosome Segregation Proteins
Chromosome segregation and cell division are essential, highly ordered processes that depend on numerous protein complexes. Results from recent RNA interference （RNAi） screens indicate that the identity and composition of these protein complexes is incompley understood. Using gene tagging on bacterial artificial chromosomes, protein localization and tandem affinity purification-mass spectrometry, the MitoCheck consortium has analyzed about 100 human protein complexes, many of which had not or only incompley been characterized. This work has led to the discovery of previously unknown, evolutionarily conserved subunits of the anaphase-promoting complex （APC/C） and the -tubulin ring complex （-TuRC）, large complexes which are essential for spindle assembly and chromosome segregation. The approaches we describe here are generally applicable to high throughput follow-up analyses of phenotypic screens in mammalian cells.