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士鋒生物骨骼肌興奮與收縮實驗注意事項
點擊次數(shù)：797 發(fā)布時間：2013-11-3
取蛙進行毀髓后制作坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本，將標(biāo)本與計算機采集系統(tǒng)相連，采集蛙肌肉收縮的張力信號。對標(biāo)本進行單刺激，可以采集到一個由潛伏期、收縮期和舒張期組成的收縮信號。對標(biāo)本進行串刺激，可以觀察到收縮的總和信號曲線。進一步縮短刺激間隔時，可以觀察到強直收縮。
【方法與步驟】
1．蛙的單毀髓與雙毀髓
一手握住蛙，背部向上（參見圖1）。用拇指壓住蛙的背部，示指按壓其頭部前端，使頭端向下低垂；另一手持毀髓針，由兩眼之間沿中線向后觸劃，當(dāng)觸及到兩耳中間的凹陷處（此處與兩眼的連線成等邊三角形）時，持針手即感覺針尖下陷，此處即是枕骨大孔的位置。將毀髓針由凹陷處垂直刺人，即可進入枕骨大孔。然后將針尖向前刺人顱腔，在顱腔內(nèi)攪動，以搗毀腦組織。如毀髓針確在顱腔內(nèi)，實驗者可感到針尖觸及顱骨。此時的動物為單毀髓動物。再將毀髓針退至枕骨大孔，針尖轉(zhuǎn)向后方，與脊柱平行刺入椎管，以搗毀脊髓。*搗毀脊髓時，可看到動物的后肢突然蹬直，而后癱軟如棉，此時的動物為雙毀髓動物。如動物仍表現(xiàn)四肢肌肉緊張或活動自如，必須重新毀髓。操作過程中應(yīng)注意使蟾蜍頭部向外側(cè)（不要擠壓耳后腺），防止耳后腺分泌物射人實驗者眼內(nèi)（如被射入，則需立即用生理鹽水沖洗眼睛）。
2．坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本制備
（1）剝制后肢標(biāo)本
將蛙腹面向上放人蠟盤中。一手持手術(shù)鑷輕輕提起恥骨聯(lián)合上方的皮膚，另一手用手術(shù)剪橫向剪開皮膚，再剪開體壁肌肉（開口要大）。然后用手術(shù)鑷輕輕提起內(nèi)臟，自恥骨部剪斷（勿損傷脊神經(jīng)）。一手輕輕托起蛙后肢，使頭部及內(nèi)臟向下，看清支配后肢的脊神經(jīng)發(fā)出部位，于其前方用金冠剪橫向剪斷脊柱。然后再沿脊柱兩側(cè)到橫向切口剪斷體壁，一手用蘸有任氏液的拇指和示指捏住斷開的脊柱后端，另一手向后撕剝皮膚并除去斷開脊柱以上部位肢體及內(nèi)臟。如果下肢撕皮困難，可在撕皮至股部時，用手勾住雙股中間后再行撕剝（右圖）。將剝干凈的后肢放人任氏液中備用。清洗手及用過的手術(shù)器械。
（2）分離兩后肢
將去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左側(cè)，用左手拇指和示指固定標(biāo)本的股部兩側(cè)肌肉，右手持手術(shù)刀，于恥骨聯(lián)合處向下按壓刀刃，切開恥骨聯(lián)合。然后用手托起標(biāo)本，用金冠剪剪開兩后肢相連的肌肉組織，并縱向剪開：脊柱（尾桿骨留在一側(cè)），使兩后肢*分離。將分開的后肢，一只繼續(xù)剝制標(biāo)本，另一只放人任氏液中備用。