QQ交談
您所在位置：請輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://true-witness.com/st236594/
士鋒生物經(jīng)典補體結(jié)合反應(yīng)
點擊次數(shù)：605 發(fā)布時間：2013-12-30
（一）預(yù)備試驗
1．綿羊紅細胞懸浮液的制備 通常用公綿羊紅細胞，將綿羊血液采集于帶有玻璃珠的無菌容器中，充分振搖，使脫去纖維，此時血液失去凝固性，稱脫纖血。
亦可用阿氏液保存血液，阿氏液配方如下：
葡萄糖 24.60g
氯化鈉 5.04g
檸檬酸鈉（含2個分子結(jié)晶水） 9.60g
蒸餾水 1 200ml
溶液配好后，高壓（10磅）滅菌10min，也可通過蔡氏濾器滅菌。溶液盛于瓶內(nèi)，將綿羊血直接采入瓶內(nèi)，血量應(yīng)大致與阿氏液量相等。搖勻，置冰箱中保存，可保存3周左右。
用時將血液移入離心管內(nèi)，加3～5倍量生理鹽水，離心沉淀洗滌三次，每次2 000r／min，離心10min，然后去掉上清液，血球泥用生理鹽水配成2.50％液應(yīng)用。
2．溶血素效價測定 溶血素是用綿羊紅細胞，經(jīng)多次免疫家兔，抽取家兔血清，加入甘油而成。在冰箱中可保存二年以上。每隔兩、三個月測定效價一次。溶血素可從生物制品廠購買。
溶血素效價測定的方法：先將溶血素稀釋成100倍，即0.20ml的溶血素（溶血素實量含0.10ml）加入9.80ml生理鹽水混合即可。然后按表6—1配成稀釋液：
表6-1溶血素稀釋表
經(jīng)典補體結(jié)合反應(yīng)（以馬鼻疽補反為例）
另取小反應(yīng)管一列，按次序從每一稀釋液取0.50ml分別加入各管中，添加時應(yīng)由稀釋度大的稀釋液加起，這樣可不必更換吸管。然后再加入生理鹽水1.00ml，1︰20補體和2.50％紅細胞懸液各0.50ml。在37℃水浴槽中放20min后判定結(jié)果。詳細操作程序見表6-2。
表6-2 溶血素效價測定示例