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去污劑對(duì)紅血球細(xì)胞膜穩(wěn)定性的影響
點(diǎn)擊次數(shù)：670 發(fā)布時(shí)間：2014-5-19
多種去污劑可以溶解細(xì)胞膜上的磷脂化合物，從而使細(xì)胞膜破裂，釋放出細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。
血紅蛋白在540nm有特異吸收峰。去污劑作用后的無細(xì)胞膜溶液于540nm處的A值大小可以表示其紅血球細(xì)胞對(duì)不同去污劑的敏感性。
步驟
1.紅血球等滲溶液的制備
取已加抗凝劑的豬血2.5mL，加生理鹽水10.0mL，離心20方針（2000rpm），收集沉下的紅血球，用生理鹽水洗滌一次（5mL），再離心20分鐘（2500rpm），收集沉淀，加10mL生理鹽水，懸浮紅血球，即為紅血球等滲溶液，備用。
2.取4支試管各加0.2mL紅血球等滲溶液，分別對(duì)應(yīng)加入10.0g/L的Triton X-100，Brij58，CTAB，SDS 5mL，小心混勻，2500rpm離心20分鐘，收集上清液，測(cè)540nm的A值（以相同操作，不含紅血球的去污劑作參比）。
以Triton X-100的A值作為100%的溶解作用，計(jì)算其它去污劑的相對(duì)溶解作用。
3.不同濃度的中性去污劑對(duì)細(xì)胞膜的溶解作用
取6支試管，各加生理鹽水5mL，紅血球等滲液1.0mL，向各管對(duì)應(yīng)加入10.0g/L、8.0g/L、6.0g/L、4.0g/L、2.0g/L、1.0g/L的Triton X-100 50Ul，小心混勻，置于37度恒溫水浴中20分鐘，2500rpm離心20分鐘，取上清液于540nm處測(cè)吸收值，計(jì)算相對(duì)溶解作用（參比液：5.0mL生理鹽水+50uL不同濃度的Triton X-100）。
以Triton X-100的不同濃度為X軸，相對(duì)溶解作用為Y軸，作圖。
4 .計(jì)算公式
去污劑對(duì)紅血球細(xì)胞膜穩(wěn)定性的影響