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公司動(dòng)態(tài)
如何進(jìn)行細(xì)胞的分裂指數(shù)測(cè)定
點(diǎn)擊次數(shù)：565 發(fā)布時(shí)間：2015-1-19
一、原理
體外培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂繁殖的能力，可用分裂指數(shù)來表示。它與生長(zhǎng)曲線有一定的，如隨著分裂指數(shù)的不斷提高，細(xì)胞也就進(jìn)入了指數(shù)生長(zhǎng)期。分裂指數(shù)指細(xì)胞群體中分裂細(xì)胞所占的百分比，它是測(cè)定細(xì)胞周期的一個(gè)重要指標(biāo)，也是不同實(shí)驗(yàn)研究選擇細(xì)胞的重要依據(jù)。
二、儀器、用品與試劑
1. 儀器與用品：CO2培養(yǎng)箱、普通顯微鏡、細(xì)胞培養(yǎng)血、蓋玻片、吸管
2. 試劑：培養(yǎng)液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液
三、 操作步驟
1. 消化細(xì)胞，將細(xì)胞懸液接至內(nèi)含蓋玻片的培養(yǎng)皿中。
2. CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，使細(xì)胞長(zhǎng)在蓋片上。
3. 取出蓋片，按下列順序操作：
PBS漂洗3分鐘→甲醇：冰醋酸=3：1固定液中固定30分鐘→Giemsa液染色10分鐘→自來水沖洗。
4. 蓋片晾干后反扣在載玻片上，鏡檢。
5. 計(jì)算:
分裂指數(shù)=分裂細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%
四、注意事項(xiàng)
操作時(shí)動(dòng)作要輕，以免使蓋片上的細(xì)胞脫落。