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減數(shù)分裂實驗
點擊次數(shù)：947 發(fā)布時間：2016-10-27
一、實驗?zāi)康?/span>
通過植物花粉母細(xì)胞的制片和觀察，了解小孢子的形成過程以及減數(shù)分裂中染色體的變化情況，并進(jìn)一步掌握細(xì)胞染色體制片的基本技能。
二、實驗原理
在高等生物里雌雄性細(xì)胞形成的過程中，都是先由有性組織（如花藥和胚珠、精巢和卵巢）中的某些細(xì)胞分化為孢母細(xì)胞（2n）,以及精母與卵母細(xì)胞（2 n）。進(jìn)一步由這些細(xì)胞進(jìn)行一種連續(xù)二次的減數(shù)分裂，即減數(shù)*分裂和減數(shù)第二分裂，zui終各自產(chǎn)生4個小孢子或精細(xì)胞，或是分別產(chǎn)生一個大孢子或卵細(xì)胞與三個退化的極體（1 n）。在分裂過程中，可以辯認(rèn)染色體形態(tài)和數(shù)量上的動態(tài)變化，從而為遺傳學(xué)研究中遠(yuǎn)緣種的分析、染色體工程中的異系鑒別、常規(guī)的組型分析以及三個基本規(guī)律的論證，提出了直接與間接的依據(jù)。
三、實驗材料
蠶豆、水稻、玉米等花藥。
四、實驗器具和藥品試劑
顯微鏡、鑷子、解剖針、刀片、載玻片、蓋玻片、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、15cm培養(yǎng)皿、小培養(yǎng)皿、廣口瓶、吸水紙。
甲醇、冰醋酸、95%乙醇、無水乙醇、樹膠、改良苯酚品紅染色液。
五、實驗方法和步驟
（一）取材固定 取材的時間及材料大小必須十分恰當(dāng)，才能獲得更多的花粉母細(xì)胞分裂相，以供觀察。
1．蠶豆 蠶豆現(xiàn)蕾后，于上午7～9時摘取莖頂幼小花序，將周圍小葉和苞葉去掉，留長約1mm 左右的花苞，放入內(nèi)裝有卡諾氏固定液的廣口瓶中，固定3～24小時，轉(zhuǎn)入70%酒精中置冰箱內(nèi)保存。
2．水稻 劍葉與其下一葉的葉枕平齊，即葉枕距為零時取材，早熟品種應(yīng)適當(dāng)提前，葉枕距可為負(fù)；晚熟品種應(yīng)延遲，葉枕距應(yīng)為正。通常穗長6～8cm，穎花長3mm為花粉母細(xì)胞分裂始期；穗長13～15cm，穎花長4mm為減數(shù)分裂盛期；穗長達(dá)全長，穎花長6mm時為減數(shù)分裂終期。于上午6～9時依上述標(biāo)準(zhǔn)取材，固定保存方法同上。
3．玉米 玉米孕穗初期，早熟品種約10片*展開葉，中熟品種約12～14片展開葉，晚熟品種約14～16片展開葉時取材。從喇叭口往下捏葉鞘，有松軟感覺，即為雄花序所在部位，用刀片縱向劃一切口，剖開取出數(shù)條花序分枝檢查，如果先端小穎花長3～4mm,花藥長2～3mm時，花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂相較多，即可取用。取材時間一般為上午7～9時，固定保存方法同上。
（二）制片方法 先將玉米幼穗置于培養(yǎng)皿內(nèi)，加進(jìn)少許70%酒精，以防材料變干。實驗時，取某一分枝，從不同部位剝離出穎花放在載玻片上。用解剖針或鑷子剝開穎殼，取出花藥，把穎殼清理干凈后，用刀片把花藥橫切二至三段，滴一滴染液，用鑷子將花粉母細(xì)胞從花藥中擠壓出來。先用低倍鏡檢查，如有所需時期的細(xì)胞，即可將花藥移到另一塊載玻片上，滴上染液，再次將花粉母細(xì)胞擠出來，可重復(fù)做二至三張片。待把空的花藥壁清除干凈后，再蓋上蓋玻片，換至高倍鏡觀察。
（三）制作*切片