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siRNA和RNAi概述
點(diǎn)擊次數(shù)：910 發(fā)布時(shí)間：2017-6-29
1 前言
RNA是生物體內(nèi)zui重要的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，它與DNA和蛋白質(zhì)一起構(gòu)成生命的框架。但長(zhǎng)久以來(lái)，RNA分子一直被認(rèn)為是小角色。它從DNA那兒獲得自己的順序，然后將遺傳信息轉(zhuǎn)化成蛋白質(zhì)。然而，一系列發(fā)現(xiàn)表明——這些小分子RNA事實(shí)上操縱著許多細(xì)胞功能。它可通過(guò)互補(bǔ)序列的結(jié)合反作用于DNA，從而關(guān)閉或調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。甚至某些小分子RNA可以通過(guò)指導(dǎo)基因的開(kāi)關(guān)來(lái)調(diào)控細(xì)胞的發(fā)育時(shí)鐘。
2 綜述
2.1 研究歷史與發(fā)展前景
2.1.1 定義
雙鏈RNA對(duì)基因表達(dá)的阻斷作用被稱(chēng)為RNA干預(yù)（RNA interference, RNAi ）雙鏈RNA經(jīng)酶切后會(huì)形成很多小片段，稱(chēng)為sirna，這些小片段一旦與信使RNA(mRNA)中的同源序列互補(bǔ)結(jié)合，會(huì)導(dǎo)致mRNA失去功能，即不能翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)，也就是使基因“沉默”了。
2.1.2 研究歷史
RNAi現(xiàn)象早在1993年就有報(bào)道： 將產(chǎn)生紫色素的基因轉(zhuǎn)入開(kāi)紫花的矮牽牛中，希望得到紫色更深的花，可是事與愿違，非但沒(méi)有加深紫色，反而成了白色。當(dāng)時(shí)認(rèn)為這是矮牽牛本來(lái)有的紫色素基因和轉(zhuǎn)入的外來(lái)紫色素基因都失去了功能，稱(chēng)這種現(xiàn)象是“共抑制”。1995年，康奈爾大學(xué)的Su Guo博士用反義rna阻斷線(xiàn)蟲(chóng)基因表達(dá)的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，反義RNA（anti sense RNA和正義RNA（sense RNA）都阻斷了基因的表達(dá)，他們對(duì)這個(gè)結(jié)果百思不得其解。直到1998年，Andrew Fire的研究證明，在正義RNA阻斷了基因表達(dá)的試驗(yàn)中，真正起作用的是雙鏈RNA。這些雙鏈RNA是體外轉(zhuǎn)錄正義RNA時(shí)生成的。于是提出了RNAi這個(gè)詞。
2.1.3 作用機(jī)理
目前RNAi的作用機(jī)理主要是在線(xiàn)蟲(chóng)，果蠅，斑馬魚(yú)等生物體內(nèi)闡明的。生物體內(nèi)的雙鏈RNA可來(lái)自于RNA病毒感染，轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，外源導(dǎo)入的基因。這些來(lái)源的雙鏈RNA誘發(fā)了細(xì)胞內(nèi)的RNAi機(jī)制，結(jié)果是病毒被清除，轉(zhuǎn)座子的表達(dá)被阻斷，外源導(dǎo)入基因表達(dá)被阻斷同時(shí)，與其同源的細(xì)胞基因組中的基因表達(dá)也被阻斷。