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技術(shù)文章

HPLC常見故障及排除方法

點(diǎn)擊次數(shù):1718 發(fā)布時(shí)間:2014-6-16

HPLC常見故障及排除方法:

色譜柱的維護(hù)

1.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過(guò)該色譜柱的pH范圍

2.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化

3.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度
4.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,保存大乙腈中
5.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理


液相色譜儀色譜柱使用及維護(hù)
每天用足夠的時(shí)間來(lái)平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問題方面獲得zui大的"補(bǔ)償",而且您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)!------ 一定得做!
新的色譜柱在使用之前應(yīng)該在您自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測(cè)試,即使用色譜柱附帶的檢驗(yàn)報(bào)告上測(cè)試條件和樣品來(lái)測(cè)定該色譜柱的柱效。并且,在以后的使用中,應(yīng)時(shí)常對(duì)色譜柱進(jìn)行測(cè)試。
卡套柱的安裝不加預(yù)柱

1.將卡套架套入柱芯
2.
將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夾套
3.
將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過(guò)夾套片
4.
將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊
5.
然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手



注意:使用卡套柱時(shí),兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時(shí)候都不能將卡套取下來(lái),否則會(huì)造成填料的流失。
卡套柱的安裝加預(yù)柱
1.
將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯

3.
將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過(guò)夾套片
4."子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)
5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊

6.
然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
7.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過(guò)濾片同時(shí)可以修補(bǔ)色譜柱

 

注意:在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前,應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗,而且修補(bǔ)工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時(shí)帶出柱子內(nèi)的填料。
1.將修補(bǔ)工具中的2套入柱芯的頂端
2.將修補(bǔ)工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中,并順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)到旋緊
3.一手握柱芯,另一只手輕輕地向外拉3,取出柱芯頂端的濾網(wǎng)
4.用一個(gè)小鏟子輕輕地取出濾網(wǎng)下面的玻璃棉以及被污染的填料
5.將新的填料用甲醇潤(rùn)濕,然后填入挖去的部位,壓平
6.裝上新的玻璃棉濾網(wǎng),并用修補(bǔ)工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端
7.柱芯頂端套上2,然后將濾網(wǎng)放入
8.壓緊,然后取下2,再用4將濾網(wǎng)的邊緣壓平


平衡色譜柱 反相色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)干掉,因此在用流動(dòng)相分析樣品之前,應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"

如何平衡色譜柱?
平衡過(guò)程中,將流速緩慢地提高
用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡

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