硫酸慶大霉素（測試物質(zhì)：慶大霉素）

硫酸慶大霉素

Ltusuan Qingdameisu Gentamicin Sulfate

  xH₂SO₄

 

慶大霉素	分子式	R1	R2	R3
Cl	C21H43N5O7	CH3	CH3	H
Cla	C19H39N5O7	H	H	H
C2	C20H41N5O7	H	CH3	H
C2a	C20H41N5O7	H	H	CH3

 

 

本品為慶大霉素C₁、C_1a、C₂、C₃等組分為主混合物的硫 酸鹽。按無水物計算，每1mg的效價不得少于590慶大霉素單位。

【性狀】本品為白色或類白色的粉末；無臭；有引濕性。

 

本品在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙mi中不溶。

比旋度   取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每 1ml中約含50mg的溶液，依法測定,比旋度 為+ 107°至十121°。

【鑒別】（1)取本品與慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品，分別加水制成 每1ml中含2.5mg的溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板（臨用前于105℃活化2小時）上；另取三氯甲烷-甲醇-氨溶液（1 :: 1)混合振搖，放置1小時，分取下層混合液為展開劑，展 開，取出于20?25°C晾干，置碘蒸氣中顯色，供試品溶液所 顯主斑點數(shù)、位置和顏色應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品溶液主斑點數(shù)、位置和 顏色相同。

（2）在慶大霉素C組分測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液各主峰保留時間應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品溶液各主峰保留時間 一致。

（3）本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。

（4）本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)。

以上（1)、（2)兩項可選做一項。

【檢查】酸度  取本品，加水制成每1ml中含40mg的溶液，依法測定，pH值應(yīng)為4.0?6.0。

溶液的澄清度與顏色  取本品5份，各0.4g,分別加5ml使溶解，溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與1號濁度標(biāo) 準(zhǔn)液比較，均不得更濃；如顯色，與黃色或黃綠色2號標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，均不得更深。

硫酸鹽  取本品約0. 125g，精密稱定，加水100ml使溶解，用濃氨溶液調(diào)節(jié)pH值至11，精密加入氯化鋇滴定液 (0.1mol/L)10ml及酞紫指示液5滴，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L)滴定，注意保持滴定過程中的pH值為11，滴定至紫色開始消褪，加乙醇50ml,繼續(xù)滴定至紫藍色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml氯化鋇滴定液 (0. 1mol/L)相當(dāng)于9. 606mg硫酸鹽（S0₄),本品含硫酸鹽按無水物計算應(yīng)為32.0%?35.0%。

有關(guān)物質(zhì)  精密稱取西索米星對照品和小諾霉素標(biāo)準(zhǔn)品各適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含西索米 星和小諾霉素各25μg、50μg和100μg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶 液（1)、（2)、（3）照慶大霉素C組分項下的色譜條件試驗，精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液（1)、（2)、（3)各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度對數(shù)值與相應(yīng)峰面積對數(shù)值的線性回歸方程，相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不小于0.99；另精密稱取本品適量，加流動相溶解并定量稀釋制 成每1ml中約含慶大霉素2.5mg的溶液，同法測定，記錄色譜圖至慶大霉素Q峰保留時間的1.2倍，供試品溶液色譜圖中如有西索米星峰、小諾霉素峰，用相應(yīng)的線性回歸方程計算西索米星、小諾霉素的含量。含西索米星不得過2.0%，小諾霉素不得過3.0%。除硫酸峰和亞硫酸峰外 (必要時用硫酸鹽和亞硫酸鹽定位），其他雜質(zhì)峰按西索米星線性回歸方程計算，單個雜質(zhì)不得過2.0% ,總雜質(zhì)不得過4.5%。供試品溶液色譜圖中小于0.1%的雜質(zhì)峰忽略不計。

水分  取本品，照水分測定法測定，含水分不得過15.0%。

熾灼殘渣  不得過0.5%。

慶大霉素C組分   照液相色譜法測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  用十八烷基硅烷鍵合硅膠 為填充劑（pH值適應(yīng)范圍0. 8?8.0)；以0.2mol/L三氟醋酸 溶液-甲醇(96：4)為流動相；流速為每分鐘0.6?0.8ml； 蒸發(fā)光散射檢測器檢測(漂移管溫度：55度，氣體流速3l/min，氣體壓力：3.8bar)測定。取慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品、小諾霉素標(biāo)準(zhǔn)品和西索米星對照品各適量，分別加流動相 溶解并稀釋制成每1ml中約含慶大霉素總C組分2. 5mg、小諾霉素0.1mg和西索米星25μg的溶液，分別量取2μl注入液相色譜儀，慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品溶液色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致， 西索米星峰和慶大霉素G_1a峰之間，慶大霉素C₂峰、小諾霉素峰和慶大霉素C_2a峰之間的分離度均應(yīng)符合規(guī)定；西索米星對 照品溶液色譜圖中主成分峰峰高的信噪比應(yīng)大于20；精密量 取小諾霉素標(biāo)準(zhǔn)品溶液20μl,連續(xù)進樣5次，峰面積的相對標(biāo) 準(zhǔn)偏差應(yīng)符合要求。

ELSD9000 蒸發(fā)光散射檢測器

測定法   精密稱取慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品適量，加流動相溶解 并定量稀釋制成每1ml中約含慶大霉素總C組分1.0mg、 2.5mg、5.0mg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液（1)、（2)、（3)。精密 量取上述三種溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標(biāo)準(zhǔn)品溶液各組分濃度對數(shù)值與相應(yīng)峰面積對數(shù)值的線性回歸方程，相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不小于0.99；另精密稱取本品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含慶大霉素2.5mg的溶液，同法測定，用慶大霉素各組分的線性回歸方程分別計算供試品中對應(yīng)組分的量（C_tcx），并按下面公式計算出各組分的含量（%，mg/mg），C₁應(yīng)為14%?22%，C_1a應(yīng)為10%?23%,C_2a+C₂應(yīng)為17%?36%，四個組分總含量不得低于50.0%。

Cx（%) = X 100%

式中C_x為慶大霉素各組分的含量（％，mg/mg);

C_tcx為由回歸方程計算出的各組分的含量（mg/ml);

m_t為供試品重量（mg);

V_t為體積(ml)。

根據(jù)所得組分的含量，按下面公式計算出慶大霉素各組

分的相對比例。C₁應(yīng)為25%?50%,C_1a應(yīng)為15%?40%， C_2a + C₂應(yīng)為20%?50%。

C’_x%= X 100%

式中C’_x為慶大霉素各組分的相對比例。

細菌內(nèi)毒素  取本品，依法檢查（通則1143)，每1mg慶大霉素中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于0.50EU。（供注射用）

【含置測定】精密稱取本品適量，加滅菌水定量制成每1ml中約含1000單位的溶液，照抗生素微生物檢定法（通則 1201)測定?？尚畔蘼什坏么笥?/span>7%。1000慶大霉素單位相 當(dāng)于1mg慶大霉素。

【類別】氨基糖苷類抗生素。

【貯藏】密封，在干燥處保存。

【制劑】（1)硫酸慶大霉素片（2)硫酸慶大霉素注射液 (3)硫酸慶大霉素緩釋片（4)硫酸慶大霉素顆粒（5)硫酸慶大霉素滴眼液

附：

 

 

雜質(zhì)	慶大霉素組分	R1	R2	R3	R4	R5	R6	分子式 分子量
雜質(zhì)F	A	OH	H	H	NH2	OH	H	C18H36N4O10468.24
雜質(zhì)G	A2	OH	H	H	H	OH	H	C18H35N3O10 453.23
雜質(zhì)C	B1	NH2    CH3		H	OH	CH3	OH	C20H40N3O10 496.27
雜質(zhì)H	X	OH	H	H	NH2	OH	CH3 C19H38N4O10 482.26

 

雜質(zhì)A(西索米星）

 

 

 

 

C₁₉H₃₇N₅O₇ 447.27

組分C_2b (小諾霉素）

 

 

C₂₀H₄₁N₅O₇ 463.30