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（一）操作室厭氧環(huán)境形成
1）按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入兩個五毒塑料袋。
2）混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調(diào)整，調(diào)節(jié)減壓閥，使輸入壓力為0.1Mpa
3）打開設(shè)備后配，電源開關(guān)后，按控制牌上的總電源鍵，使設(shè)備通電。
4）操作室放入1000g鈀粒（密封）和500g干燥劑，并放入美蘭指示條。
5）關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗。（按控制面牌上真空泵鍵，按一下開，再按一下關(guān)）
6）操作室內(nèi)*次置換（氮氣置換）：
（1）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一個插入塑料袋。
（2）接通氮氣進氣路，打開操作室氮氣控制閥，使兩只塑料袋充足氮氣后，關(guān)閉電磁閥，然后扎緊袋口。
（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
（4）把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸的放于操作室內(nèi)，至全部防除
7）操作室第二次置換（氮氣置換）重復(fù)一次沖氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。
8）操作室第三次置換（混合氣體置換） （混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%）
（1）調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進氣，沖氣時取樣室先抽真空，并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。
（2）混合氣充滿塑料袋后，關(guān)閉電磁閥，并打開混合氣限流閥，使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計、調(diào)整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。
（3）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
（4）通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9）操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點潔凈水，1-2小時后，觀察其變色情況，反應(yīng)部分深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
注：1指示條可反復(fù)使用，2 不可接觸蘭色反應(yīng)區(qū)3包春在密封管內(nèi)，防止在干燥處。10紫外線滅菌燈，室內(nèi)進行滅菌處理，滅菌時間自定。
（二）菌種的置入和培養(yǎng)
1）檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2）打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們。
3）取樣室充氮置換三次過程，先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停，然后打開取樣室氧氣閥進氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。
4）如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5）取樣室外門開啟、關(guān)緊后，再抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗。
6）厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
（1）每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察，如不能正常就必須重新?lián)Q氣。
（2）要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結(jié)合通過催化吸收，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
（3）.連續(xù)培養(yǎng)運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。（換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi)，干燥2－3小時可使其復(fù)原）
7）接種棒滅菌器的應(yīng)用：
（1）隨時用鎳?yán)与姛峤z使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）。
（2）熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
8）操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。
（三）注意事項
1．儀表盡可能地安裝于空氣清靜，溫度變化較小的地方。
2．開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。
3．培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入。
4．如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。（超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）。
5．經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。
6．調(diào)換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體
7．真空泵按要求使用，定期檢查加油。
8．停止使用，關(guān)閉總電源鍵，及設(shè)備后部的電源開關(guān)
（四）常見故障及處理
| 現(xiàn)象 | 原理 | 處理 |
| 1、無電源 | 1、插頭未插或短線 | 1、插好插頭 |
| 2、熔斷器開路 | 2、更換同型號熔絲管 | |
| 3、電源開關(guān)壞 | 3、更換電源開關(guān) | |
| 2、培養(yǎng)箱不開蓋 | 1、設(shè)定溫度低 | 1、調(diào)整設(shè)定溫度 |
| 2、探頭壞 | 2、更探頭 | |
| 3、操作室、取樣室漏氣 | 1、密封不好 | 1、用肥皂水校漏后用704密封 |
| 2、年久橡皮圈老化 | 2、更換橡皮圈 | |
| 4、氣路不通 | 1、氣閥壞 | 1、更換氣閥 |
| 2、皮管漏氣或脫落 | 2、更換皮管 | |
| 3、氣瓶氣用完 | 3、更換氣體 | |
| 5、燈不亮 | 1、起輝器或燈不亮 | 1、更換起輝器或燈管 |
| 2、整流器燒壞 | 2、更換整流器 |
